mikroskop lapangan gelap adalah instrumen optik khusus yang digunakan di laboratorium tertentu. Ini adalah hasil modifikasi yang dilakukan pada mikroskop brightfield. Mikroskop medan gelap dapat dilakukan dengan trans-iluminasi atau dengan epi-iluminasi.
Yang pertama didasarkan pada pemblokiran sinar cahaya yang mencapai kondensor secara langsung, melalui penggunaan perangkat yang dipasang sebelum sinar cahaya mencapai kondensor.
Mikroskop medan gelap / Treponema terlihat pada mikroskop medan gelap. Sumber: Dietzel65 [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0).eu/Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu dan Patrick L McGeer [CC OLEH 2.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0)]
Bidang gelap dengan cahaya yang ditransmisikan memungkinkan untuk menyorot struktur, mampu mengamati partikel yang sangat tipis. Struktur terlihat dengan beberapa pembiasan atau kecerahan pada latar belakang gelap.
Sedangkan efek epi-iluminasi dicapai dengan cahaya datang atau miring. Dalam hal ini, mikroskop harus dilengkapi dengan filter khusus berbentuk bulan sabit.
Dengan pencahayaan insiden, struktur yang diamati ditandai dengan menghadirkan efek visual dalam relief tinggi. Properti ini memungkinkan untuk menyorot tepi partikel tersuspensi.
Tidak seperti mikroskop brightfield, mikroskop darkfield sangat berguna untuk memvisualisasikan slide fresco yang mengandung partikel tersuspensi, tanpa pewarnaan apapun.
Namun memiliki beberapa kelemahan, di antaranya tidak dapat digunakan untuk sediaan kering atau sediaan bernoda. Itu tidak memiliki resolusi yang baik. Selanjutnya, untuk memastikan gambar yang baik, bukaan numerik objektif tidak boleh melebihi bukaan kondensor.
Indeks artikel
Karakteristik
Komposisi mikroskop medan gelap menyajikan modifikasi penting sehubungan dengan medan terang, karena dasar-dasar kedua mikroskop itu berlawanan.
Sedangkan pada medan terang berkas cahaya dikonsentrasikan sehingga melewati sampel secara langsung, pada medan gelap berkas dihamburkan sehingga hanya berkas miring yang mencapai sampel. Ini kemudian disebarkan oleh sampel yang sama, mentransmisikan gambar ke arah tujuan.
Jika fokus pada slide tanpa sampel, lingkaran gelap akan diamati, karena tanpa sampel tidak ada yang menghamburkan cahaya ke arah objektif.
Untuk mendapatkan efek yang diinginkan di bidang visual, perlu menggunakan kondensor khusus, serta diafragma yang membantu mengontrol berkas cahaya.
Dalam bidang pandang bidang gelap, unsur atau partikel dalam suspensi tampak terang dan bias sementara bidang lainnya gelap, membuat kontras yang sempurna.
Jika oblique atau cahaya datang digunakan, efek tepi dengan relief tinggi diperoleh pada struktur yang diamati.
Bagian mikroskop darkfield
Sumber: amazon.com
-Sistem mekanik
Tabung
Ini adalah perangkat di mana gambar dipantulkan dan diperbesar oleh tujuan perjalanan sampai mencapai lensa mata atau lensa mata.
Mengaduk
Ini adalah dukungan di mana tujuan yang berbeda berada. Target tidak tetap, mereka dapat dihapus. Revolver dapat diputar sedemikian rupa sehingga target dapat diubah ketika operator membutuhkannya.
sekrup makro
Sekrup ini digunakan untuk memfokuskan spesimen, bergerak maju atau mundur untuk membawa spesimen lebih dekat atau lebih jauh dari target, dan gerakannya aneh.
Sekrup mikrometer
Sekrup mikrometer digerakkan maju atau mundur untuk memindahkan spesimen lebih dekat atau lebih jauh dari target. Sekrup mikrometri digunakan untuk gerakan yang sangat halus atau halus, hampir tidak terlihat. Ini adalah salah satu yang mencapai fokus utama.
Rol mesin tulis
Ini adalah dukungan di mana spesimen akan beristirahat di slide. Ini memiliki bukaan pusat di mana berkas cahaya lewat. Ketika sekrup makro dan mikrometer dipindahkan, panggung naik atau turun, tergantung pada gerakan sekrup.
Mobil
Kereta memungkinkan seluruh sampel untuk dilalui dengan tujuan. Gerakan yang diperbolehkan adalah maju mundur dan sebaliknya, dan dari kiri ke kanan dan sebaliknya.
Memegang Forceps
Ini terletak di atas panggung, terbuat dari logam dan memiliki fungsi menahan slide agar tidak menggelinding selama pengamatan. Adalah penting bahwa sampel tetap difiksasi saat sedang diamati. Pengencang berukuran tepat untuk menerima slide.
Lengan atau pegangan
Lengan menghubungkan tabung dengan alas. Ini adalah tempat di mana mikroskop harus dipegang ketika akan dipindahkan dari satu sisi ke sisi lain. Dengan satu tangan, lengan digenggam dan alas dipegang dengan tangan lainnya.
Dasar atau kaki
Sesuai dengan namanya, itu adalah dasar atau penyangga mikroskop. Berkat alasnya, mikroskop dapat tetap dan stabil pada permukaan yang datar.
-sistem optik
sasaran
Mereka berbentuk silinder. Mereka memiliki lensa di bagian bawah yang memperbesar gambar yang berasal dari sampel. Tujuannya bisa dari berbagai perbesaran. Contoh: 4,5X (kaca pembesar), 10X, 40X dan 100X (objektif perendaman).
Objektif perendaman dinamakan demikian karena memerlukan beberapa tetes minyak untuk ditempatkan di antara objektif dan sampel. Yang lainnya disebut target kering.
Tujuan dicetak dengan karakteristik yang dimilikinya.
Contoh: merek pabrikan, koreksi kelengkungan bidang, koreksi aberasi, perbesaran, bukaan numerik, sifat optik khusus, media pencelupan, panjang tabung, panjang fokus, ketebalan kaca penutup, dan warna cincin kode.
Lensa memiliki lensa depan yang terletak di bagian bawah dan lensa belakang yang terletak di bagian atas.
Lensa mata
Mikroskop tua bermata satu, yaitu, mereka hanya memiliki satu lensa mata, dan mikroskop cararn adalah teropong, yaitu, mereka memiliki dua lensa mata.
Lensa mata berbentuk silinder dan berongga. Ini memiliki lensa konvergen di dalam yang memperluas gambar virtual yang dibuat oleh lensa.
Lensa mata bergabung dengan tabung. Yang terakhir memungkinkan gambar yang ditransmisikan oleh tujuan untuk mencapai lensa mata, yang akan memperbesarnya lagi.
Lensa okuler di bagian atasnya berisi lensa yang disebut lensa okuler dan di bagian bawahnya terdapat lensa yang disebut kolektor.
Ia juga memiliki diafragma dan tergantung di mana letaknya ia akan memiliki nama. Yang terletak di antara kedua lensa disebut lensa okuler Huygens dan jika terletak setelah 2 lensa disebut lensa okuler Ramsden. Meskipun ada banyak orang lain.
Perbesaran lensa okuler berkisar antara 5X, 10X, 15X atau 20X, tergantung pada mikroskop.
Melalui lensa mata atau eyepieces operator dapat melihat sampel. Beberapa caral memiliki cincin di lensa mata kiri yang dapat dipindahkan dan memungkinkan penyesuaian gambar. Cincin yang dapat disesuaikan ini disebut cincin diopter.
-Sistem pencahayaan
Lampu
Ini adalah sumber penerangan dan terletak di bagian bawah mikroskop. Cahaya adalah halogen dan dipancarkan dari bawah ke atas. Pada umumnya lampu yang dimiliki mikroskop adalah 12 V.
diafragma
Diafragma mikroskop medan gelap tidak memiliki iris; Dalam hal ini, mencegah sinar yang datang dari lampu mencapai sampel secara langsung, hanya balok miring yang akan menyentuh spesimen. Balok-balok yang dihamburkan oleh struktur yang ada dalam sampel adalah yang akan melewati target.
Ini menjelaskan mengapa struktur terlihat cerah dan bercahaya di bidang yang gelap.
Kondensator
Kondensor mikroskop medan gelap berbeda dari mikroskop medan terang.
Ada dua jenis: kapasitor bias dan kapasitor refleksi. Yang terakhir pada gilirannya dibagi menjadi dua kategori: paraboloid dan cardioids.
Kapasitor bias
Kondensor jenis ini memiliki piringan yang disisipkan untuk membiaskan sinar cahaya, dapat terletak di atas lensa depan atau di sisi belakang.
Sangat mudah untuk mengimprovisasi kondensor jenis ini, karena cukup menempatkan di depan lensa depan kondensor piringan yang terbuat dari karton hitam yang lebih kecil dari lensa (diafragma).
Mikroskop cahaya medan terang dapat diubah menjadi mikroskop medan gelap menggunakan ujung ini.
kapasitor refleksi
Mereka adalah yang digunakan oleh mikroskop stereo. Ada dua jenis: paraboloid dan cardioid.
- Paraboloid: mereka memiliki jenis kelengkungan yang disebut paraboloid karena kemiripannya dengan parabola. Jenis kondensor ini banyak digunakan dalam studi sifilis, karena memungkinkan untuk mengamati Treponema.
- Cardioid : kelengkungan kondensor mirip dengan bentuk hati, maka nama “cardioid”, kondensor menyandang nama yang sama. Ini memiliki diafragma yang dapat disesuaikan.
Fitur
-Ini digunakan untuk menyelidiki keberadaan Treponema pallidum dalam sampel klinis.
-Ini juga berguna untuk mengamati Borrelia dan Leptospira.
-Ini sangat ideal untuk mengamati perilaku sel atau mikroorganisme secara in vivo , selama tidak perlu merinci struktur tertentu.
-Sangat ideal untuk menonjolkan kapsul atau dinding mikroorganisme.
Keuntungan
-Mikroskop medan gelap dengan kondensor bias lebih murah.
-Penggunaannya sangat berguna dalam perbesaran 40X.
-Ideal untuk mengamati sampel yang memiliki indeks bias mirip dengan media di mana mereka ditemukan. Misalnya, sel dalam kultur, ragi atau bakteri motil seperti spirochetes (Borrelias, Leptospiras dan Treponemas).
-Sel dapat diamati secara in vivo, yang memungkinkan evaluasi perilakunya. Misalnya, gerakan Brown, gerakan dengan flagela, gerakan dengan emisi pseudopoda, proses pembelahan mitosis, penetasan larva, tunas ragi, fagositosis, antara lain.
-Ini memungkinkan untuk menyorot tepi struktur, misalnya kapsul dan dinding sel.
-Hal ini dimungkinkan untuk menganalisis partikel terpilah.
-Penggunaan pewarna tidak perlu.
Kekurangan
-Perhatian khusus harus diberikan saat memasang preparat, karena jika terlalu tebal mereka tidak akan diamati dengan baik.
-Resolusi gambar rendah.
-Mikroskop medan gelap yang menggunakan kondensor bias memiliki persentase luminositas yang sangat rendah.
-Untuk meningkatkan kualitas gambar dengan objektif pencelupan (100X), perlu untuk mengurangi bukaan numerik objektif dan dengan demikian meningkatkan kerucut iluminasi. Untuk ini, penting untuk memasukkan diafragma tambahan yang dapat mengatur bukaan numerik dari objektif.
-Anda tidak dapat melihat slide kering, atau slide berwarna, kecuali jika itu adalah noda vital.
-Itu tidak memungkinkan visualisasi struktur tertentu, terutama yang internal.
-Mikroskop medan gelap lebih mahal.
Referensi
- “Mikroskop medan gelap.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 26 Agustus 2018, 00:18 UTC. 30 Juni 2019, 01:06 <wikipedia.org
- Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnosis leptospirosis dari sampel darah dan kultur dengan pengamatan di bawah mikroskop lapangan gelap. biomedis. 2008; 28 (1): 7-9. Tersedia dari: scielo.org
- RodrÃguez F. Jenis mikroskop optik. Blog Laboratorium Klinik dan Biomedis. Tersedia di: franrzmn.com
- Kontributor Wikipedia. Mikroskop medan gelap. Wikipedia, ensiklopedia gratis. 19 Oktober 2018, 00:13 UTC. Tersedia di: wikipedia.org
- Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Evaluasi mikroskop lapangan gelap, kultur dan kit serologi komersial dalam diagnosis leptospirosis. Mikrobiol J Med India. 2015; 33 (3): 416-21. Tersedia di: nlm.nih.gov
