kultur darah adalah tes penampilan bakteriologi untuk kehadiran mikroorganisme di dalam darah. Darah pada dasarnya adalah cairan steril dan karenanya harus disimpan dalam kondisi fisiologis, sehingga keberadaan bakteri atau jamur dalam darah selalu bersifat patologis.
Ketika bakteri atau jamur ditemukan dalam darah, tetapi perbanyakan tidak melebihi eliminasi mikroorganisme oleh sistem kekebalan, itu disebut bakteremia (untuk bakteri) atau fungemia (untuk jamur); Tetapi jika mikroorganisme meningkat jumlahnya tidak terkendali, itu disebut septikemia.
Botol kultur darah (kuning: aerobiosis pediatrik, hijau: aerobiosis dewasa, dan merah: anaerobiosis dewasa). Sumber: foto diambil oleh penulis MSc Marielsa Gil.
Bakteremia, fungemia dan septikemia membahayakan nyawa penderita dan oleh karena itu harus segera diobati. Itu sebabnya, bila ada kecurigaan infeksi dalam darah, dokter meminta pemeriksaan kultur darah.
Analisis bakteriologis ini memungkinkan kita untuk mengetahui apakah ada infeksi dalam darah dan mikroorganisme mana yang terlibat. Selain itu, jika positif, tes sensitivitas dilakukan untuk mengetahui antibiotik atau antijamur mana yang dapat digunakan dalam pengobatan.
Sebaliknya, jika biakan darah negatif pada inkubasi 24 jam, tidak boleh dibuang sampai negatif selama 240 jam. Ini memastikan bahwa tidak ada mikroorganisme yang tumbuh lambat.
Agar kultur darah dapat diandalkan, tindakan aseptik yang ekstrem harus diterapkan saat mengambil sampel, dan untuk meningkatkan keandalan dan sensitivitas tes, minimal dua sampel harus diambil selama atau mendekati puncak demam.
Indeks artikel
Untuk apa?
Darah adalah cairan steril dan ketika mikroorganisme ditemukan di dalamnya, itu adalah 100% patologis. Situasi ini merupakan gambaran klinis yang sangat halus yang membahayakan kehidupan pasien.
Kultur darah adalah tes bakteriologis penting yang mendeteksi keberadaan mikroorganisme dalam aliran darah.
Mikroorganisme dapat mencapai darah melalui rute yang berbeda, yang dapat berupa infeksi ekstravaskular seperti: pneumonia, infeksi intra-abdominal, pielonefritis, infeksi serius pada kulit, jaringan lunak atau radang sendi, dan lain-lain.
Atau bisa juga secara intravena, misalnya kontaminasi kateter intravena atau arteri, endokarditis, kecanduan obat intravena, pemberian obat atau larutan yang terkontaminasi, dll.
Deteksi dini dan pengobatan agen penyebab sepsis sangat penting untuk memastikan kelangsungan hidup pasien.
Dalam hal ini, dokter harus menunjukkan realisasi kultur darah ketika ia mengamati tanda dan gejala yang menunjukkan septikemia, seperti: demam (lebih dari 38 ° C) tanpa fokus infeksi yang jelas atau, sebaliknya, hipotermia (<de 36°C).
Tanda-tanda lain mungkin: menggigil, peningkatan jumlah sel darah putih (> 10.000 sel / mm 3 ) atau penurunan signifikan sel polimorfonuklear (<1.000 PMN / mm 3 ). Serta kerusakan multi-organ atau hilangnya vitalitas secara tiba-tiba, di antara tanda-tanda peringatan lainnya.
Bakteremia bisa konstan, sementara, atau intermiten. Hal ini penting untuk pengambilan sampel, karena pengambilan sampel harus dilakukan ketika kemungkinan ditemukan mikroorganisme yang berperedaran lebih besar.
Untuk itu disarankan untuk mengambil minimal 2 sampel di tempat yang berbeda. Selain itu, sampel yang ideal diambil pada puncak demam atau saat pasien menunjukkan gejala menggigil, hipotermia ekstrim, berkeringat atau takikardia.
Namun, agar kultur darah menjadi alat yang benar-benar berguna, sampel harus diambil dengan sangat hati-hati. Penanganan yang buruk atau asepsis yang buruk pada saat pengambilan sampel dapat membuat pengujian menjadi tidak valid, sehingga diperoleh hasil positif palsu.
Dasar
Penelitian terdiri dari mengambil dua atau tiga sampel darah secara aseptik dan menempatkannya dalam botol khusus.
Alat khusus untuk kultur sampel darah disebut botol kultur darah. Ini diklasifikasikan menjadi:
Sesuai dengan usia pasien
-penggunaan pediatrik
-Untuk orang dewasa.
Menurut jenis mikroorganisme
– Stoples untuk mikroorganisme aerob (bakteri aerob, bakteri fakultatif dan jamur).
-Botol kultur darah untuk mikroorganisme anaerob (bakteri anaerobik ketat).
Beberapa mengandung media kultur cair dan beberapa mengandung media kultur padat dan cair pada saat yang bersamaan. Mereka juga ada dengan partikel karbon aktif.
Proses
Rekomendasi untuk pengambilan sampel
– Sampel harus diambil oleh personel yang sangat terlatih dan terlatih di bidang mikrobiologi.
– Asepsis atau pembersihan menyeluruh dari tempat pengumpulan sampel tidak diragukan lagi merupakan langkah yang paling penting.
– Seperti semua pengambilan sampel, petugas kesehatan harus sepenuhnya mematuhi langkah-langkah keamanan hayati selama proses berlangsung (antara lain penggunaan sarung tangan, gaun pelindung, kacamata).
– Berhati-hatilah agar semua peralatan yang diperlukan untuk pengambilan sampel tersedia.
– Labeli vial dengan nama lengkap pasien, tanggal, nomor rekam medis, waktu pengambilan sampel, dan nomor urut laboratorium.
-Idealnya, sampel diambil sebelum pasien memulai terapi antimikroba. Ini hanya diindikasikan dalam kasus yang dicurigai tidak berfungsinya perawatan yang sedang berlangsung. Dalam hal ini, sampel harus diambil sebelum penggantian obat, menggunakan botol kultur darah dengan inhibitor antibiotik (partikel karbon aktif).
– Setidaknya harus diambil 2 sampel di lokasi anatomi yang berbeda, seperti lengan kanan dan lengan kiri. Pada dugaan endokarditis, 3 sampel direkomendasikan. Dua botol (satu untuk aerobiosis dan satu untuk anaerobiosis) akan dimasukkan dalam setiap sampel.
Jumlah sampel
Jumlah sampel bervariasi sesuai dengan usia pasien, tetapi rasio 1:5 banding 1:10 harus selalu dipertahankan sehubungan dengan pengenceran kaldu darah/kultur.
Pada bayi baru lahir, jumlah sampel yang direkomendasikan adalah 1 ml darah per vial. Botol pediatrik digunakan.
Dalam kasus bayi antara satu bulan dan satu tahun, dapat ditingkatkan menjadi 1,5 ml darah per botol. Botol pediatrik digunakan.
Pada anak-anak yang lebih tua dari 2 tahun jumlah sampel yang tepat adalah 2,5 ml darah per botol. Botol pediatrik digunakan.
Dari masa remaja dapat ditingkatkan menjadi volume darah antara 5 – 10 ml per botol. Botol dewasa digunakan.
Terakhir pada tahap dewasa jumlah yang diperlukan adalah 8-10 ml per botol. Botol dewasa digunakan.
Contoh
– Sampel darah bisa vena atau arteri. Namun, darah arteri diambil hanya jika pengambilan sampel vena tidak memungkinkan.
– Tidak dianjurkan untuk mengambil sampel dari kateter vena sentral kecuali:
- Tidak mungkin mengambil sampel secara perifer (vena atau arteri).
- Pasien dengan risiko perdarahan.
- Bila dokter menduga bakteremia akibat kontaminasi kateter vena sentral.
- Ketika demam muncul kembali setelah demam berhenti selama 4 sampai 5 hari, terlepas dari apakah pasien sedang menjalani pengobatan antimikroba atau tidak.
Asepsis sebelum pengambilan sampel
– Pilih situs anatomi untuk pengambilan sampel. Umumnya, vena kaliber terbaik dipilih (vena basilika atau cephalic).
– Menurut Pusat Pengendalian Penyakit (CDC) di Atlanta (AS), operator harus mencuci tangan mereka dengan klorheksidin 2% atau povidon yodium 10% sebelum pengambilan sampel, selain mengenakan sarung tangan.
– Palpasi dan temukan vena yang akan digunakan.
-Bersihkan area tusukan dengan cara berputar, lakukan gerakan dari tengah ke luar menggunakan sabun chlorhexidine atau sabun antiseptik. Bilas dengan saline steril.
Selanjutnya, oleskan antiseptik dan biarkan bekerja. Contoh klorheksidin glukonat 0,5% selama 1 menit atau povidon iodin 10% selama 2 menit. Untuk yang terakhir, tanyakan dulu apakah pasien alergi terhadap yodium. Jika Anda alergi, Anda bisa mengganti alkohol 70%.
Ekstraksi sampel
– Pasang torniket untuk memperparah aliran darah dan menumbuhkan vena.
– Jangan sentuh situs tusukan dengan jari Anda lagi. Jika ini benar-benar diperlukan, jari harus dicuci dengan cara yang sama seperti area tusukan.
-Masukkan jarum injektor atau kulit kepala ke dalam vena dan ambil darah yang diperlukan.
-Jangan menempelkan kapas atau kain kasa pada jarum saat melepasnya jika tidak steril.
-Lepaskan segel pengaman dari botol dengan sangat hati-hati dan tanpa menyentuh tutupnya. Beberapa penulis merekomendasikan melakukan desinfeksi steker sebelum menginokulasi sampel.
– Distribusikan jumlah darah yang sesuai ke dalam vial. Jika sampel diambil dengan injektor, jumlah yang diperlukan pertama-tama dituangkan ke dalam labu anaerobik dan kemudian ke dalam labu aerobik. Jika pengambilan dilakukan dengan kulit kepala (kupu-kupu) maka dituang sebaliknya.
– Campur botol kultur darah secara perlahan dengan cara dibalik.
– Ganti sarung tangan dan ulangi langkah sebelumnya untuk pengambilan sampel kedua.
-Jika sampel kedua diambil dari situs yang berbeda dapat langsung dilakukan, tetapi jika dari situs yang sama harus menunggu antara 30 hingga 90 menit antara sampel yang satu dengan yang lainnya.
– Sampel harus segera dibawa ke laboratorium, jika tidak memungkinkan harus dibiarkan pada suhu kamar hingga 18 jam.
Budaya
Setelah di laboratorium, labu diinkubasi pada 37 ° C di bawah kondisi masing-masing labu, yaitu dalam aerobiosis dan anaerobiosis.
Di bawah metode manual, dering harus dimulai pada 24 jam inkubasi dan kemudian berdering antar-hari. Cincin dilakukan sebagai berikut: pertama tutup botol didesinfeksi dan jarum injektor steril dimasukkan. Cairan diekstraksi dari labu dan ditanam pada agar darah dan agar coklat.
Jika ada pertumbuhan, dilakukan Gram, subkultur pada media tertentu, uji biokimia dan antibiogram.
Dalam metode otomatis, peralatan Bact / Alert membunyikan alarm ketika mendeteksi bahwa sebuah vial positif. Dengan cara yang sama, harus dioleskan pada agar darah dan agar coklat.
Metode lain yang sedang berkembang adalah dengan menganalisis labu pada inkubasi 6 jam melalui spektrometri massa. Metode ini telah membantu meningkatkan sensitivitas dan kecepatan diagnosis.
Hasil
Selama botol kultur darah negatif, laporan perantara awal dapat diberikan kepada dokter yang merawat. Laporan menunjukkan bahwa itu negatif dalam beberapa jam inkubasi. Misalnya, jika negatif hingga hari keempat, akan dilaporkan sebagai berikut:
Hasil awal: kultur negatif pada 96 jam inkubasi.
Catatan: belajar berlanjut selama 240 jam.
Jika kultur darah positif, dokter yang merawat segera diberitahu dan laporan dikirim dengan setidaknya satu gram koloni. Contoh:
Hasil awal: dalam kultur positif setelah 48 jam inkubasi, basil gram negatif dan oksidase negatif diamati. Identifikasi dan pengujian sensitivitas sedang berlangsung.
Informasi ini memandu dokter yang merawat untuk memulai terapi empiris terhadap kemungkinan mikroorganisme, sambil menunggu hasil akhir dari laboratorium.
Setelah menyelesaikan studi bakteriologis, yaitu mikroorganisme telah diidentifikasi dan antibiogram tersedia, laporan akhir harus dikirim sesegera mungkin.
Perhatian khusus harus diberikan jika mikroorganisme target adalah Neisseria gonorrhoeae atau Neisseria meningitidis, karena bakteri ini dihambat dengan adanya sodium polyanethosulfonate (SPS) konsentrasi tinggi.
Itu sebabnya senyawa ini tidak boleh melebihi 0,025% dalam botol kultur darah.
Di sisi lain, jika sampel kultur darah pertama kali diambil dalam tabung Vacutainer, tabung ini memiliki konsentrasi toksik SPS untuk meningokokus dan gonokokus, sehingga darah harus ditransfer dalam waktu 1 jam ke sistem kultur kaldu.
Bagaimana mengetahui apakah kultur darah positif atau terkontaminasi?
Kultur darah dianggap terkontaminasi bila hanya tumbuh satu vial kultur darah dari total yang diambil. Dan kecurigaan kontaminasi meningkat jika mikroorganisme yang diisolasi adalah mikrobiota kulit yang biasa: contoh: Staphylococcus koagulase negatif, Propionibacterium spp, antara lain.
Namun, pada pasien immunocompromised, mikroorganisme tidak boleh diabaikan, tetapi dalam kasus ini mikroorganisme harus muncul di beberapa sampel.
Sebaliknya, jika sensitivitas terhadap antibiotik dari mikroorganisme yang sama yang diisolasi dalam dua sampel yang berbeda adalah sama, maka infeksi tersebut nyata.
Karakteristik lain adalah jumlah bakteri, karena kultur darah yang terkontaminasi tumbuh terlambat, sedangkan infeksi nyata pada pasien yang tidak diobati umumnya positif pada 14 jam inkubasi ketika mikroorganisme tidak mengganggu.
Di sisi lain, pada pasien yang diobati dengan antimikroba, mikroorganisme yang terlibat mungkin membutuhkan waktu untuk tumbuh karena bebannya sangat rendah.
Munculnya lebih dari satu mikroorganisme mungkin menunjukkan kontaminasi, tetapi jika hasil yang sama diulangi dalam beberapa pengambilan dari tempat yang berbeda, maka itu nyata.
Referensi
- “Budaya darah.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 3 Juli 2019, 17:28 UTC. 14 Jul 2019, 19:05 en.wikipedia.org
- Hervé B. Teknologi baru dalam diagnosis mikrobiologi: otomatisasi dan beberapa aplikasi dalam identifikasi mikroba dan studi kerentanan. Pdt. Med. Klinik . Hitungan. 2015; 26 (6) 753-763. Tersedia di: reader.elsevier.com
- Villarroel P. Bab 20: Sepsis dan risiko penyakit kardiovaskular. Kesehatan jantung. hal 187-194. Tersedia di: fbbva.es
- Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Kultur darah: Apa yang mereka katakan kepada Anda dan apa yang Anda lakukan? Sakit gumpalan . 2012; 11 (26): 146-163. Tersedia di: scielo.isc
- Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Probabilitas keberhasilan memperoleh kultur darah positif. Med. Internal Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Tersedia di: scielo.org