setrimid agar atau setrimid adalah media kultur padat selektif dirancang untuk isolasi Pseudomonas aeruginosa. Hal ini didasarkan pada produksi pigmen karakteristik spesies ini dan dibuat dari modifikasi Tech agar, yang dibuat oleh King, Ward dan Raney.
Formula aslinya mengandung garam magnesium klorida, kalium sulfat, pencernaan gelatin pankreas, dan agar-agar. Modifikasi formula terdiri dari penambahan setrimid (setil trimetil amonium bromida) dan gliserol.
Cetrimide agar yang diunggulkan dengan Pseudomonas aeruginosa Sumber: BiotechMichael [Domain publik], dari Wikimedia Commons
Agar cetrimide berguna untuk studi mikrobiologi sampel di mana diduga adanya Pseudomonas aeruginosa . Perlu dicatat bahwa bakteri ini sangat penting, karena meskipun merupakan bagian dari mikrobiota lingkungan normal, ia sering berperilaku sebagai patogen oportunistik.
Oleh karena itu, salah satu masalah yang paling sering disebabkan oleh kuman ini adalah infeksi nosokomial, yaitu yang terjadi di lingkungan rumah sakit, menyerang pasien yang memiliki daya tahan tubuh yang rendah.
Di sisi lain, karena afinitas yang dimiliki mikroorganisme ini dengan kelembaban, target kontaminasi yang paling rentan adalah: alat bantu pernapasan, obat-obatan, nebulizer, sumber air, AC, desinfektan, larutan sabun, larutan injeksi, luka terbuka, kateter, saluran kemih, antara lain.
Dalam pengertian ini, agar cetrimide berguna untuk melakukan kontrol mikrobiologis dan kultur terhadap unsur-unsur yang disebutkan sebelumnya.
Indeks artikel
Dasar
Cetrimide agar didasarkan pada kemampuan medium untuk mendorong pertumbuhan P. aeruginosa , merangsang produksi pigmennya dan pada gilirannya menghambat pertumbuhan mikroorganisme lain.
Sifat-sifat tersebut disebabkan oleh fungsi dari masing-masing komponennya. Pepton gelatin yang ada berfungsi sebagai sumber nitrogen, vitamin dan mineral. gliserol atau gliserin bekerja sebagai sumber karbon.
Sedangkan setrimid (cetyl trimetil amonium bromida) adalah zat yang menghambat pertumbuhan bakteri selain P. aeruginosa , termasuk spesies lain yang termasuk dalam genus yang sama.
Penghambatan terjadi karena cetramid bertindak sebagai deterjen kationik, mengatur untuk mengacaukan membran plasma sebagian besar bakteri, kecuali P. aeruginosa dan beberapa lainnya yang berhasil bertahan.
Di sisi lain, mengandung magnesium klorida dan kalium sulfat. Senyawa ini merangsang ekspresi fenotipik terkait dengan kemampuan Pseudomonas aeruginosa menghasilkan berbagai pigmen, antara lain: pyocyanin, pyoverdin, pyorrubin, pyomelanin, dan fluorescein. Terakhir, mengandung agar-agar, yang memberikan konsistensi padat.
Penafsiran
Interpretasi pertumbuhan yang diperoleh dalam agar-agar ini dilakukan sebagai berikut:
Pengamatan koloni bulat, halus dengan tepi teratur, dengan produksi pigmen biru-hijau, hijau, coklat atau kemerahan, ditambah emisi bau buah (aminoacetophenone), merupakan hasil dugaan adanya bakteri ini dalam sampel tersebut.
Di sisi lain, pengamatan pigmen kuning kehijauan cerah pada koloni ketika piring terkena sinar ultraviolet menunjukkan P. aeruginosa .
Fluoresensi koloni P. aeruginosa pada agar cetrimide di bawah sinar ultraviolet.
Perlu dicatat bahwa setiap warna yang diamati disebabkan oleh produksi pigmen tertentu. Pigmen biru-hijau sesuai dengan produksi pyocyanin, hijau untuk pyoverdin, kemerahan untuk pyorubin, coklat untuk pyomelanin dan fluoresensi kuning-hijau cerah di bawah sinar UV untuk fluorescein.
Persiapan
Timbang 43 g media dehidrasi dan larutkan dalam air suling. Tambahkan 10 ml gliserol. Bawa campuran ke sumber panas. Biarkan mendidih selama beberapa menit sampai benar-benar larut.
Autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit. Diamkan dan sajikan dalam cawan Petri steril saat suhu sekitar 50°C.
Biarkan mengeras, balikkan, pesan dalam plakros dan simpan di lemari es sampai digunakan. Piring agar cetrimide harus dikeluarkan dari lemari es terlebih dahulu dan dibiarkan hangat sampai suhu kamar untuk penyemaian.
PH akhir media harus 7,2 ± 0,2.
Warna media yang didehidrasi adalah krem dan preparatnya putih buram.
Kegunaan
Semua jenis sampel yang diduga Pseudomonas aeruginosa dapat ditaburkan pada agar cetrimide . Oleh karena itu, berguna di semua bidang mikrobiologi (lingkungan, industri, klinis, air dan makanan).
Sangat penting untuk menganalisis lingkungan rumah sakit dan dengan demikian dapat menerapkan tindakan korektif, karena mikroorganisme ini mencapai pasien melalui peralatan, obat-obatan, larutan, dan persediaan yang terkontaminasi yang digunakan oleh pasien.
Dengan cara ini, mikroorganisme dapat menginfeksi saluran pernapasan bagian bawah, saluran kemih dan luka pasien imunosupresi.
Penghitungan koloni P. aeruginosa juga dapat dilakukan dalam uji batas mikroba.
Ditaburkan
Cetrimide agar dapat digunakan sebagai kultur primer. Pelat diinokulasi di salah satu tepinya dan dari sana didistribusikan oleh kelelahan ke seluruh pelat. Sampel cair dapat diunggulkan dengan spatula drigalski.
Plate diinkubasi secara aerobik pada suhu 37°C selama 24 jam inkubasi.
Keterbatasan
-Sebagian kecil strain Pseudomonas aeruginosas tidak menghasilkan pyocyanin, sehingga negatif palsu dapat diinterpretasikan.
-Beberapa spesies Pseudomonas yang penting secara klinis dihambat dalam media ini.
-Meskipun mengamati karakteristik yang dijelaskan untuk Pseudomonas aeruginosa , mereka harus dikuatkan dengan tes identifikasi tambahan. Tes yang tidak boleh kurang adalah tes oksidase, harus positif.
-Beberapa Enterobacteriaceae dapat tumbuh dalam media ini dan mengembangkan pigmen kuning, tetapi berbeda dari Pseudomonas aeruginosa dalam hal ketika pelat dikenai sinar ultraviolet tidak ada fluoresensi.
– Serratia marcescens berhasil mengembangkan dan menghasilkan pigmen merah muda.
-Jika pelat yang diunggulkan dengan agar cetrimide diekspos selama beberapa waktu pada suhu kamar, galur P. aeruginosa dapat kehilangan fluoresensi yang diamati di bawah sinar ultraviolet, namun sifat tersebut diperoleh kembali jika diinkubasi lagi pada 37 ° C.
QA
Untuk menganalisis kinerja cetrimide agar yang baik, dapat digunakan strain kontrol, seperti: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 dan Staphylococcus aureus ATCC 25923.
Hasil yang diharapkan adalah:
- Pertumbuhan yang baik untuk P. aeruginosa , dengan pigmen biru-hijau dan fluorescein positif.
- S. maltophilia dan S. aureus akan dihambat sebagian hingga seluruhnya.
- Escherichia coli diharapkan dapat dihambat sepenuhnya.
Referensi
- Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Karakterisasi fenotipik dan serologis dari isolat klinis Pseudomonas aeruginosa. Monitor Vaksin. 2004; 13 (3): 1-9.
- Laboratorium Conda Pronadisa. dasar agar-agar cetrimide. 2014.Tersedia di: condalab.com
- Laboratorium Britannia. agar-agar setrimid. 2015.Tersedia di: britanialab.com
- Laboratorium BD. BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013.Tersedia di: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratory, CA Cetrimide agar. 2009.Tersedia di: http://f-soria.es
