agar MacConkey adalah media padat yang memungkinkan isolasi eksklusif bakteri gram negatif. Karena alasan ini, ini adalah media selektif dan juga memungkinkan pembedaan antara basil yang memfermentasi laktosa dan non-fermentasi, yang membuatnya menjadi media diferensial. Ini adalah salah satu media kultur yang paling banyak digunakan di laboratorium mikrobiologi.
Media ini terutama digunakan untuk isolasi basil Gram negatif yang termasuk dalam famili Enterobacteriaceae , termasuk spesies oportunistik dan enteropatogen.
Agar MacConkey diunggulkan dengan dua jenis bakteri. Koloni yang memfermentasi laktosa sebelah kiri, koloni yang tidak memfermentasi laktosa sebelah kanan.
Ini juga dapat digunakan untuk mengisolasi basil enterik lain yang menghuni saluran pencernaan, tetapi tidak termasuk Enterobacteriaceae , seperti Aeromonas sp, Plesiomonas sp, antara lain.
Akhirnya, dapat mengisolasi basil Gram negatif non-fermentasi glukosa lainnya yang ditemukan di lingkungan, air atau tanah, tetapi kadang-kadang dapat menjadi patogen oportunistik seperti Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia , antara yang lain.
Indeks artikel
Dasar
Agar MacConkey
Fondasi media ini dapat dijelaskan melalui deskripsi komponennya, karena masing-masing memiliki tujuan yang menentukan propertinya.
Garam empedu dan kristal violet
Dalam pengertian ini, agar MacConkey memiliki komposisi yang kompleks. Pertama mengandung garam empedu dan kristal violet.
Unsur-unsur ini bertanggung jawab untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan beberapa batang Gram negatif yang rewel. Pada gilirannya, itu mendukung perkembangan basil Gram negatif yang tidak terpengaruh oleh zat-zat ini. Oleh karena itu media selektif.
Dikatakan sedikit selektif dibandingkan dengan media lain yang juga menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan juga sebagian besar bakteri Gram negatif.
Pepton, polipekton, dan laktosa
Ini mengandung zat yang memberikan nutrisi yang diperlukan untuk mikroorganisme yang berkembang di media ini, seperti pepton, polipekton, dan laktosa.
Laktosa adalah titik kunci untuk media menjadi media diferensial, karena mikroorganisme yang memiliki kemampuan untuk memfermentasi laktosa akan mengembangkan koloni merah muda yang kuat.
Beberapa bakteri dapat memfermentasi laktosa secara perlahan atau lemah, membentuk koloni berwarna merah muda pucat dan tetap positif laktosa.
Mereka yang tidak memfermentasi laktosa menggunakan pepton sebagai sumber energi, menghasilkan amonia, alkalizing medium. Untuk alasan ini, koloni yang berasal tidak berwarna atau transparan.
indikator PH
Perubahan warna dicapai melalui senyawa penting lain yang dimiliki MacConkey Agar. Senyawa ini merupakan indikator pH yang dalam hal ini berwarna merah netral.
fermentasi hasil laktosa dalam produksi asam campuran. Mereka mengasamkan media hingga pH di bawah 6,8.
Hal ini menyebabkan indikator pH berubah menjadi warna pink tua. Intensitas warna dapat bervariasi tergantung pada pH akhir.
Air suling, natrium klorida, dan agar
Di sisi lain, mengandung air suling dan natrium klorida yang memberikan hidrasi medium dan keseimbangan osmotik. Akhirnya, media mengandung agar-agar, yang merupakan dasar yang memberikan konsistensi media padat.
Media agar MacConkey yang disiapkan harus memiliki pH akhir yang disesuaikan dengan 7,1 ± 0,2.
Persiapan
Untuk satu liter agar MacConkey, 50 g media dehidrasi harus ditimbang, kemudian ditempatkan dalam labu dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 10 menit istirahat dipanaskan, aduk terus sampai mendidih selama 1 menit.
Labu tersebut kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121°C selama 20 menit. Pada akhir waktu, dikeluarkan dari autoklaf dan dibiarkan dingin sampai suhu 45°C, untuk kemudian disajikan dalam cawan Petri steril di dalam laminar flow hood atau di depan pembakar Bunsen.
Biarkan memadat dan simpan dalam wadah piring terbalik dan dinginkan di lemari es pada 2-8 ° C sampai digunakan.
Untuk mendapatkan agar MacConkey yang menghambat efek peringatan yang dihasilkan oleh genus Proteus, digunakan agar MacConkey rendah garam.
Penggunaan agar MacConkey konvensional
MacConkey Agar termasuk dalam semua set media kultur yang disiapkan untuk penaburan sampel klinis yang diterima di laboratorium. Ini juga berguna dalam mikrobiologi makanan dan mikrobiologi lingkungan.
Keragaman batang Gram negatif yang tumbuh di media ini menunjukkan karakteristik fenotipik yang membantu membuat diagnosis dugaan spesies yang bersangkutan. Misalnya, ukuran, warna, konsistensi, dan bau koloni adalah beberapa karakteristik yang dapat memandu.
Dalam media ini, spesies Escherichia coli , Klebsiella sp dan Enterobacter sp menghasilkan koloni merah muda yang kuat, dikelilingi oleh zona endapan empedu.
Sedangkan bakteri seperti Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp dan Hafnia sp dapat tampak tidak berwarna setelah 24 jam atau berwarna merah muda pucat dalam 24-48 jam.
Demikian pula, genus Proteus, Edwadsiella, Salmonella dan Shigella menghasilkan koloni yang tidak berwarna atau transparan.
Varian lain dari agar MacConkey
Ada varian lain dari MacConkey Agar yang memiliki tujuan tertentu. Mereka disebutkan di bawah ini:
Agar MacConkey dengan sorbitol
Media ini dirancang untuk membedakan galur enteropatogenik ( enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) dari galur Escherichia coli lainnya .
Media ini menukar karbohidrat laktosa dengan sorbitol. E. coli enterohaemorrhagic strain O157: H7 berbeda dari yang lain karena mereka tidak memfermentasi sorbitol dan oleh karena itu diperoleh koloni transparan, sedangkan strain E. coli lainnya memfermentasi sorbitol dan koloni berwarna merah muda kuat.
Agar MacConkey tanpa kristal violet atau garam
Agar ini sangat berbeda dari agar MacConkey klasik, karena tidak memiliki kristal ungu, dan bakteri Gram positif dapat tumbuh.
Di sisi lain, tidak adanya garam menghambat munculnya kerumunan pada agar-agar yang dihasilkan oleh beberapa basil enterik, seperti genus Proteus, dan dengan demikian memfasilitasi isolasi semua bakteri yang ada, termasuk bakteri Gram positif.
Agar MacConkey dengan cefoperazone
Varian MacConkey Agar ini awalnya dirancang untuk mengisolasi Laribacter hongkongensis dan kemudian ditemukan berguna untuk isolasi Arcobacter butzleri. Sebuah MBOS yang sedikit melengkung Gram – basil negatif tahan terhadap cefoperazone.
Bakteri ini baru-baru ini dikaitkan dengan penyebab gastroenteritis dan diare yang didapat pada individu Asia dan Eropa, muncul sebagai dua patogen kuat yang muncul.
Antibiotik memungkinkan untuk menghambat flora yang menyertai saluran pencernaan, yang mendukung perkembangan bakteri ini, mencegah mereka dari tidak diketahui, karena mereka membutuhkan 72 jam untuk tumbuh.
Agar MacConkey disiapkan dengan air laut pada 10% v / v
Varian ini berguna untuk evaluasi indikator sanitasi bakteri dari kontaminasi tinja, termasuk total coliform dan coliform tinja di perairan asin rekreasi (pantai dan teluk).
Cortez et al pada tahun 2013 menunjukkan bahwa media yang disiapkan dengan cara ini secara signifikan meningkatkan pemulihan mikroorganisme ini di lingkungan salin, dibandingkan dengan penggunaan agar MacConkey yang disiapkan dengan air suling.
Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa media yang dimodifikasi merangsang pertumbuhan bakteri yang secara fisiologis dalam keadaan latensi “layak tetapi tidak dapat dikultur”, oleh karena itu mereka tidak dapat dipulihkan dalam media konvensional.
Referensi
- Lau SK, Woo PC, Hui WT, dkk. Penggunaan agar cefoperazone MacConkey untuk isolasi selektif Laribacter hongkongensis . Mikrobiol J Clin . 2003; 41 (10): 4839-41.
- “Agar MacConkey.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 29 Des 2018, 15:22 en.wikipedia.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Argentina. Editorial Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. (edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
- Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media budaya disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa di Chichiriviche, negara bagian Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
- García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinik praktis. Universitas Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.
