minyak imersi adalah cairan bening kental memiliki indeks yang tinggi bias. Untuk alasan ini banyak digunakan dalam pengamatan mikroskopis, karena memberikan sifat pemusatan cahaya ketika melewati objektif 100X mikroskop, meningkatkan daya pisahnya.
Hal ini terjadi karena film kental terbentuk antara tujuan dan smear, mencegah sinar cahaya menyebar ketika mereka mencapai udara, sehingga memusatkan berkas cahaya menuju sampel.
Penetes dengan minyak imersi dan mikroskop difokus dengan objektif 100X menggunakan minyak imersi. Sumber: Pixabay.com
Minyak imersi hanya digunakan dengan objektif 100X. Itulah mengapa objektif 100X disebut juga objektif imersi. Sisanya dikenal sebagai target kering. Lensa ini tidak dapat digunakan tanpa minyak imersi, karena tanpanya visualisasi tidak akan memuaskan.
Fungsi utama minyak imersi adalah untuk memberikan gambar yang lebih jelas, lebih tajam, dan lebih jelas, memungkinkan pengamatan detail yang tidak mungkin dilakukan dengan lensa lain.
Minyak pertama yang digunakan untuk tujuan ini adalah minyak adas manis, digunakan bersama dengan lensa imersi pertama yang dibuat oleh Giovanni Battista Amici. Ini hanya mencegah aberasi kromatik, tetapi tidak meningkatkan bukaan numerik sistem lensa.
Kemudian minyak cedar digunakan, tetapi memiliki banyak kelemahan yang memaksa tidak digunakan. Diantaranya adalah keasamannya yang tinggi, yang merugikan tujuan jangka pendek.
Selanjutnya, bahan lain seperti air dan gliserin digunakan sampai minyak imersi sintetis dibuat, yang sedikit demi sedikit disempurnakan hingga mencapai minyak imersi saat ini, yang merupakan senyawa kompleks zat organik.
Indeks artikel
Komposisi minyak imersi
Minyak imersi terdiri dari campuran senyawa organik seperti: terfenil, terfenil terhidrogenasi, hidrokarbon alami dan polibutena.
Karakteristik minyak imersi
Minyak imersi adalah cairan kuning muda, penampilan agak kental, dengan bau yang khas dan kepadatan antara 0,92 dan 0,99 g / cm 3 .
Minyak imersi tidak larut dalam air, dan memiliki titik didih 340 °C. Indeks bias a (n 20 ° C / D): berkisar 1,482 – 1,516. Sedangkan flash index adalah 110°C dan viskositas berkisar antara 100 hingga 120 mPa.s.
Produk ini harus dibuang dengan benar, karena bersifat ekotoksik. Dengan kata lain, itu berbahaya bagi lingkungan, terutama mempengaruhi hewan air . Di sisi lain, itu mengiritasi kulit dan selaput lendir. Jika tertelan itu nefrotoksik dan kardiotoksik.
Minyak imersi stabil pada suhu 15 hingga 25 ° C, suhu di mana ia harus disimpan.
Dasar-dasar Minyak Perendaman
Saat menggunakan lensa perbesaran yang lebih tinggi, intensitas cahaya harus ditingkatkan. Namun, banyak berkas cahaya yang hilang karena tersebar ketika mencapai udara (ruang antara kaca penutup dan lensa), dan bahkan beberapa sinar dipantulkan secara total.
Minyak imersi memiliki indeks bias yang mirip dengan kaca. Oleh karena itu, ketika oli bersentuhan antara lensa 100X dan kaca penutup, berkas cahaya terkonsentrasi.
Sinar terkonsentrasi melewati sampel dan mempertajam gambar, yaitu, meningkatkan bukaan numerik objektif dan mengoreksi penyimpangan kromatik dan bola.
Penggunaan atau aplikasi
Penggunaan minyak imersi terutama diperlukan ketika diperlukan untuk mengamati gambar secara lebih luas, menggunakan objektif perbesaran tertinggi (objektif 100X) untuk melihat detail yang penting untuk menegakkan diagnosis.
Oleh karena itu, banyak digunakan dalam studi mikroskopis di berbagai bidang seperti: histologi, sitologi, hematologi dan bakteriologi. Misalnya, berguna untuk mempelajari karakteristik sel dan jaringan pasien.
Ini juga digunakan untuk analisis apusan darah, di mana perlu untuk merinci karakteristik hemoparasit di dalam dan di luar eritrosit, serta dalam preparat Gram, untuk menentukan karakteristik morfotintorial mikroorganisme.
Hal ini umumnya digunakan dalam persiapan tetap, karena tidak dianjurkan dalam persiapan segar. Hal ini karena tegangan permukaan oli menyebabkan kaca penutup bergerak, menyebabkan sampel bergeser selama pengamatan dan mencegah analisis.
Di sisi lain, minyak imersi tidak hanya berguna dalam mikroskop cahaya konvensional: minyak imersi juga digunakan dalam mikroskop fluoresensi refleksi internal total (TIRFM) dan dalam aplikasi fluoresensi confocal.
Langkah-langkah mengamati sediaan menggunakan minyak imersi
Untuk melihat slide di bawah mikroskop, slide pertama-tama harus difokuskan dengan perbesaran objektif terendah, biasanya 10X, dengan intensitas cahaya rendah.
Kemudian diteruskan ke tujuan 40X, dan jalur cahaya sedikit meningkat. Beberapa analisis dapat dilakukan pada perbesaran ini, tetapi perbesaran 100X diperlukan untuk melihat detail struktur.
Sebelum pindah ke tujuan 100X, setetes minyak imersi ditempatkan pada kaca penutup, tepat di tempat yang ingin Anda amati, kemudian turret mikroskop dipindahkan untuk menemukan tujuan 100x dalam preparasi.
Intensitas cahaya diatur (ditingkatkan) (dengan menggerakkan kondensor dan membuka diafragma). Kemudian dengan beberapa gerakan kecil sekrup mikrometer (maju atau mundur) seharusnya fokus sempurna jika mikroskop menggunakan objektif parafokal.
Jika Anda mencoba memfokuskan preparasi secara langsung dengan lensa imersi, Anda mungkin kesulitan menemukan fokusnya. Ini bukan tindakan yang tidak mungkin, tetapi kesulitannya meningkat secara signifikan.
peduli
Untuk menggunakan minyak imersi, kondisi tertentu harus diperhatikan.
Jika telah dibuat sediaan berwarna, seperti sediaan yang diwarnai dengan Giemsa atau Gram, tunggu sampai sediaan benar-benar kering sebelum dioleskan minyak imersi. Jika tidak, minyak bersama dengan air akan membentuk misel yang tidak akan membuat sediaan terlihat.
Di sisi lain, setelah mengamati batch persiapan, yaitu, pada akhir hari kerja, tujuan 100X harus dibersihkan dengan hati-hati, menggunakan kertas lensa dengan etanol. Jika lensa dibiarkan kotor, minyak akan mengering di atasnya dan akan sangat sulit untuk menghilangkannya, merusak bidang pandang.
Demikian juga harus diperhatikan bahwa minyak mudah terbakar dan harus dijauhkan dari sumber panas (pemantik api). Penting untuk menghindari pemanasan di atas 65 ° C.
Akhirnya, minyak adalah produk beracun. Oleh karena itu, kontak langsung dengan kulit dan selaput lendir harus dihindari , karena dapat menyebabkan iritasi ringan. Untuk menghindari kecelakaan, disarankan untuk menggunakan sarung tangan dan kacamata pengaman untuk menanganinya.
Jika terkena minyak, area tersebut harus dicuci dengan banyak air. Jika minyak memercik ke mata, itu harus dicuci dengan cara yang sama, menjaga mata tetap terbuka. Jika tertelan secara tidak sengaja, penting untuk minum air hangat dan dimuntahkan, selain pergi ke dokter terdekat.
Referensi
- “Total Mikroskop Fluoresensi Refleksi Internal.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 30 Des 2018, 22:46 UTC. 14 Mei 2019, 01:54 <https://es.wikipedia.org/w
- IVD. Mikroskop minyak imersi. Tersedia di: Pengguna / Tim / Unduhan.
- Biologi Lingkungan dan Mikrobiologi. Pengoperasian mikroskop optik. Tersedia di: eumed.net/books.
- Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Sejarah mikroskop dan dampaknya terhadap Mikrobiologi. Rev Hum Med , 2015; 15 (2): 355-372. Tersedia dalam: scielo.
- Herrero J. Praktik No. 1: Dasar-dasar dan penggunaan mikroskop optik senyawa umum. Universitat d´Alacant Tersedia di: rua.ua.es/dspace
- Scharlau – MSDS. Minyak imersi, untuk mikroskop. 2001. Tersedia di: inputs-labcentral.
