XLD agar atau Xylose Lysine desoxycholate agar media adalah selektif dan budaya yang solid diferensial untuk isolasi enteropatogen. Taylor merancang formula XL agar (Xylose, Lysine) untuk meningkatkan isolasi genus Shigella.
Dia mengamati bahwa genus ini dihambat di sebagian besar media yang ditujukan untuk isolasi enteropatogen. Selanjutnya, natrium deoksikolat, natrium tiosulfat dan besi amonium sitrat ditambahkan untuk meningkatkan selektivitasnya. Formula ini telah terbukti berguna untuk isolasi Shigella dan Salmonella.
Perbedaan koloni Shigella, Salmonella dan coliform pada agar XLD. A. Shigella sp, B. Salmonella sp, C. Coliforms. Sumber: A. Oleh: CDC / Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, Atas perkenan: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat B. https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-_Showing_H2S_production_-_Detail.jpg C. Oleh: CDC / Dr. Petani JJ, Atas perkenan: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat
XLD Agar terdiri dari ekstrak ragi, natrium deoksikolat, xilosa, lisin, laktosa, sukrosa, natrium tiosulfat, besi amonium sitrat, natrium klorida, fenol merah dan agar. XLD Agar dan SS Agar digunakan di sebagian besar laboratorium bakteriologi untuk pemeriksaan sampel tinja untuk Shigella dan Salmonella.
Laboratorium lain lebih menyukai kombinasi CHROMagar Salmonella dan agar XLD, di antara pilihan lain yang tersedia. Duo ini dapat disiapkan dalam cawan Petri ganda. Di satu sisi mereka menempatkan agar XLD dan di sisi lain media yang dipilih.
Indeks artikel
Dasar
-kekuatan nutrisi
Agar XLD memiliki ekstrak ragi, yang berfungsi sebagai sumber nutrisi bagi mikroorganisme yang berkembang pada agar ini. Selain itu, adanya karbohidrat (xylose, sukrosa dan laktosa) memberikan energi bagi bakteri yang dapat memfermentasinya.
-Selektivitas media
Sebagai zat penghambat, ia memiliki natrium deoksikolat; Ini mencegah pertumbuhan bakteri Gram positif, membuat medium selektif.
-Kekuatan diferensial
Koloni Shigella yang khas
Seperti yang telah disebutkan, agar XLD mengandung xilosa; Karbohidrat ini difermentasi oleh semua bakteri yang tumbuh di media ini kecuali genus Shigella.
Ini adalah salah satu ciri yang membedakannya, karena koloni Shigella dibedakan dari yang lain dengan mengembangkan koloni merah, sedangkan bakteri lain menghasilkan koloni kuning.
Koloni khas Salmonella
Genus Salmonella juga memfermentasi xilosa, awalnya menghasilkan koloni kuning. Namun, setelah menghabiskan karbohidrat xilosa, ia menyerang lisin untuk enzim lisin dekarboksilase. Dekarboksilasi lisin menghasilkan alkali yang mengubah warna koloni dan media sekitarnya menjadi merah asli.
Perilaku ini hanya dilakukan oleh Salmonella, karena koliform yang mendekarboksilat lisin tidak dapat membuat media menjadi basa. Ini karena koliform juga memfermentasi laktosa dan sukrosa yang ada; oleh karena itu, produksi asam sangat tinggi, meninggalkan koloni kuning pada bakteri ini.
Perlu dicatat bahwa genus Salmonella tidak memfermentasi sukrosa atau laktosa.
Produksi H 2 S
XLD agar juga memungkinkan deteksi H 2 S spesies memproduksi Salmonella ; Untuk ini, ia bergantung pada sumber belerang yang diwakili oleh natrium tiosulfat dan pengembang reaksi, yaitu besi amonium sitrat.
Yang terakhir bereaksi dengan H 2 S (gas tidak berwarna) dan membentuk endapan hitam yang tidak larut dari besi sulfat. Dalam pengertian ini, ciri-ciri koloni salmonella akan berwarna merah dengan bagian tengah berwarna hitam.
Perlu dicatat bahwa untuk H 2 S reaksi pembentukan terjadi , pH basa diperlukan. Itulah sebabnya Enterobacteriaceae lain yang membentuk H 2 S tidak dapat atau melakukannya dengan buruk di lingkungan ini, karena keasaman tinggi yang dihasilkan oleh fermentasi karbohidrat yang ada menghambat atau menghambat reaksi.
-Natrium klorida, agar dan fenol merah
Akhirnya, natrium klorida mempertahankan keseimbangan osmotik; agar adalah zat pemadatan dan fenol merah mendeteksi perubahan pH, mengubah warna koloni dan media.
Persiapan
Timbang 55 g media XLD dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air. Panaskan dan aduk campuran sampai mencapai titik didih . Jangan terlalu panas, karena panas merusak media dan menciptakan endapan yang mengubah morfologi koloni yang khas.
Media ini tidak boleh diautoklaf. Saat larut, itu harus dilewatkan ke penangas air pada 50 ° C. Saat didinginkan, harus disajikan langsung di atas cawan Petri steril. Mereka dapat dituangkan ke dalam piring tunggal atau piring ganda. Mereka dibiarkan memadat dan disimpan di lemari es sampai digunakan.
Tempelkan sebelum digunakan. Karena ini adalah media yang tidak steril, disarankan untuk menyiapkannya mendekati tanggal penggunaan.
PH akhir media harus 7,4 ± 0,2. Warna media yang disiapkan adalah oranye-merah, tembus cahaya, tanpa endapan.
Jika Anda memiliki agar dasar Xylose Lysine (XL), Anda dapat menambahkan natrium deoksikolat, natrium tiosulfat, dan besi amonium sitrat. Dengan cara ini diperoleh formula agar XLD.
Kegunaan
Agar XLD digunakan untuk pemulihan enteropatogen, terutama dari genus Shigella dan yang kedua dari genus Salmonella. Hal ini berguna untuk mengevaluasi sampel tinja, air dan makanan.
Jenis sampel
Kotoran
Sampel feses dapat ditaburkan langsung pada agar XLD, membuat distribusi bahan yang baik untuk mendapatkan koloni yang terisolasi.
Untuk meningkatkan pemulihan Salmonella, agar XLD dapat digores dari media pengayaan Salmonella.
Makanan
Dalam hal makanan, kaldu pengayaan untuk Salmonella dan Shigella dapat digunakan. Untuk Salmonella, kaldu selenite cystine, kaldu tetrathionate hijau cerah, antara lain, dapat digunakan.
Dalam kasus Shigella, dapat diperkaya dengan kaldu Shigella dengan 0,5 / ml novobiocin, diinkubasi pada 42 ° ± 1 ° C selama 16-20 jam.
Air
Dalam analisis air, teknik filtrasi membran dan penggunaan agar XLD direkomendasikan antara lain.
Menabur dan kondisi identifikasi
Media yang disemai diinkubasi secara aerobik pada suhu 35 ° C selama 24 hingga 48 jam.
Koloni khas dari setiap genus diamati, koloni yang mencurigakan harus menjalani tes biokimia untuk identifikasi mereka.
QA
Untuk mengevaluasi kontrol kualitas media, strain bakteri berikut dapat digunakan: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella abony DSM 4224 , Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.
Genus Salmonella dicirikan dengan adanya koloni berwarna merah dengan bagian tengah berwarna hitam atau koloni yang benar-benar hitam pada media ini. Sedangkan pada genus Shigella, koloninya harus berwarna merah, yaitu warna medium.
Dalam kasus Escherichia coli, diharapkan dapat dihambat seluruhnya atau sebagian; jika tumbuh koloni berwarna kuning. Untuk Proteus mirabilis , pertumbuhan yang buruk diharapkan dengan koloni merah muda dengan atau tanpa pusat hitam. Akhirnya genus Klebsiella akan tumbuh sebagai koloni berwarna kuning.
Pikiran terakhir
XLD agar banyak digunakan di laboratorium bakteriologi oleh efisiensi tinggi untuk pemulihan Shigella dan juga memiliki pemulihan yang baik dari genus Salmonella.
Rall et al (2005) dalam karyanya yang berjudul “Evaluation of three enrichment broths and five solid media for the detection of Salmonella in birds” menunjukkan bahwa dari 3 media klasik yang diuji (agar hijau terang, agar SS dan agar XLD) , XLD agar memiliki tingkat pemulihan terbaik.
Persentase pemulihan adalah sebagai berikut: 13,8% untuk agar hijau terang, 27,6% untuk SS, dan 34,5% untuk XLD. Itu hanya dilampaui oleh media kromogenik Rambach agar dengan pemulihan 48% dan CHROMagar dengan 79,3%.
Referensi
- Penyakit bawaan makanan. Shigellosis. Tersedia di: anmat.gov.ar
- “Agar XLD.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 9 Februari 2019, 11:46 UTC. 10 Apr 2019, 19:25 wikipedia.org
- Laboratorium BBL. CHROMagar Salmonella / BD XLD Agar (biplate). 2013 Tersedia di: bd.com
- Lab.Neogen. agar-agar XLD. Tersedia di: foodsafety.neogen
- Laboratorium Francisco Soria Melguizo. Agar-agar XLD. Tersedia di: http://f-soria.es/Inform
- Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Evaluasi tiga kaldu pengayaan dan lima media plating untuk deteksi Salmonella pada unggas. braz. J. Mikrobiol. 2005; 36 (2): 147-150. Tersedia dari: scielo.br
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
