soy agar tryptone atau Trypticase Soy Agar adalah media kultur padat, dan nutrisi nonselektif. Itu ditunjuk oleh huruf TSA untuk akronimnya dalam bahasa Inggris Trypticase Soy Agar. Ini terdiri dari triptein, pepton kedelai, natrium klorida, dan agar-agar.
Karena kekuatan nutrisinya yang tinggi, ini sangat ideal untuk budidaya mikroorganisme yang menuntut dan tidak menuntut. Medium tanpa suplemen tambahan tidak direkomendasikan untuk kultur primer, tetapi sangat berguna untuk subkultur galur murni dan menjaganya tetap hidup, di antara kegunaan lainnya.
Trypticasein soy agar wedges dalam tabung dengan tutup bakelite. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSc. Marielsa Gil.
Juga, agar ini berfungsi sebagai dasar untuk persiapan media yang diperkaya seperti agar darah, terutama ketika diperlukan untuk mengamati pola hemolisis dan untuk memasang taksa optokin dan bacitracin, yang diperlukan dalam diagnosis masing-masing Streptococcus pneumoniae dan Streptococcus pyogenes .
Di sisi lain, bila dikombinasikan dengan antibiotik, berguna untuk mengisolasi mikroorganisme fakultatif dan anaerobik ketat yang penting secara klinis dari sampel dengan flora campuran.
Akhirnya, komposisi trypticasein soy agar dan kinerjanya memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh farmakope yang berbeda (Eropa, Jepang dan Amerika Utara).
Indeks artikel
Dasar
Untuk perkembangan bakteri yang tepat , keberadaan pasokan energi diperlukan, seperti asam amino, vitamin, basa purat dan pirimidat.
Dalam pengertian ini, triptein dan pepton kedelai menyediakan nutrisi ini untuk mikroorganisme, sehingga memungkinkan perkembangan penuh mereka. Namun, untuk bakteri rewel, perlu untuk melengkapi agar ini dengan darah yang didefibrinasi atau darah yang dihangatkan untuk meningkatkan pengayaannya.
Di sisi lain, jika antibiotik ditambahkan ke media, itu menjadi media selektif. Ekstrak ragi 0,6% juga dapat ditambahkan untuk mendukung isolasi spesies genus Listeria, sedangkan penambahan telurit sistin dan darah domba sangat ideal untuk Corynebacterium diphteriae.
Akhirnya, natrium klorida memberikan keseimbangan osmotik ke media dan agar-agar memberikan konsistensi padat.
Persiapan
Piring Agar Kedelai Trypticasein
Untuk menyiapkan trypticasein soy agar, 40 g media komersial dehidrasi harus ditimbang pada skala digital. Ini larut dalam satu liter air suling yang terkandung dalam labu.
Campuran dibiarkan istirahat selama 5 menit dan kemudian dibawa ke sumber panas untuk membantu melarutkan media. Itu harus sering diaduk dan direbus selama 1 atau 2 menit. Selanjutnya media disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit.
Biarkan dingin hingga 50 ° C dan distribusikan ke dalam cawan Petri steril. Biarkan mengeras, balikkan, pesan dalam plakat dan simpan di lemari es.
PH akhir media harus 7,3 ± 0,2.
Perlu dicatat bahwa warna media kultur yang dikeringkan adalah krem muda dan harus disimpan antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering.
Untuk bagiannya, agar yang disiapkan berwarna kuning muda. Piring yang sudah jadi harus disimpan di lemari es (2-8 ° C) sampai digunakan.
Pelat harus mencapai suhu kamar sebelum digunakan.
Piring agar kedelai trypticasein dilengkapi dengan darah
agar darah disiapkan oleh menambahkan 5% darah defibrinated pada saat pendinginan kedelai agar tryptone pada 50 ° C Campuran dihomogenkan dengan cara diputar dengan gerakan lembut.
Sajikan dalam cawan Petri steril. Warna tengahnya harus merah ceri.
Piring agar kedelai trypticasein dilengkapi dengan darah hangat
Untuk menyiapkan agar darah berbasis TSA, lakukan sama seperti prosedur yang sudah dijelaskan, tetapi ketika meninggalkan autoklaf, diamkan hingga suhu medium kira-kira antara 56 hingga 70 ° C. Pada saat itu darah ditempatkan dan dicampur sampai medium berubah menjadi coklat.
Sajikan dalam cawan Petri steril. Warna mediumnya coklat coklat.
Tryptic Soy Agar Wedges
Prosedur preparasi agar-agar sama dengan yang dijelaskan untuk cawan, dengan perbedaan bahwa media tersebut tidak disajikan pada cawan Petri, melainkan didistribusikan antara 10 sampai 12 ml dalam tabung dengan tutup Bakelite sebelum disterilkan.
Selanjutnya tabung-tabung tersebut diautoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit. Saat meninggalkan mereka cenderung dengan bantuan dukungan dan dibiarkan mengeras.
Irisan yang disiapkan ditaburkan berdasarkan luas permukaan dan berfungsi untuk menjaga mikroorganisme tertentu yang tidak menuntut tetap hidup selama waktu tertentu.
Kegunaan
Trypticasein Soy Agar digunakan dalam kasus berikut:
-Sebagai dasar untuk menyiapkan agar darah klasik yang digunakan secara rutin di sebagian besar laboratorium.
-Isolasi bakteri yang menuntut.
– Observasi pola hemolisis.
-Pelaksanaan tes diagnostik.
-Sebagai dasar untuk menyiapkan agar darah khusus untuk Corynebacterium diphteriae, dengan sistin telurit dan darah domba.
-Sebagai bahan dasar pembuatan agar darah domba, ditambah kanamisin-vankomisin untuk pertumbuhan bakteri anaerob terutama Bacteroides sp.
– Untuk pemeliharaan galur yang tidak menuntut (Bacterioteca).
– Hitung mikroba aerobik dalam studi batas mikroba air, lingkungan, makanan dan sampel kosmetik.
Ditaburkan
Sampel dapat ditaburkan langsung ke permukaan Trypticasein Soy Agar yang dilengkapi dengan darah atau bahan tambahan lainnya. Itu ditaburkan oleh kelelahan.
Sedangkan pelat agar kedelai trypticasein tanpa aditif umumnya digunakan untuk subkultur strain mikroba (bakteri atau ragi).
QA
Kontrol sterilitas
Untuk memeriksa sterilitas berbagai media yang disiapkan dengan agar-agar berbahan dasar kedelai trypticasein, disarankan untuk melakukan hal berikut: dari setiap batch yang disiapkan, 1 atau 2 pelat atau tabung yang tidak diinokulasi harus diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam untuk menunjukkan sterilitasnya. Dalam semua kasus itu harus tetap tanpa pertumbuhan.
Jika kontaminasi ditemukan, seluruh bets harus dibuang.
Kontrol pertumbuhan
Strain bakteri berikut dapat digunakan untuk mempelajari berfungsinya agar trypticasein kedelai: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugosa ATCC 9027 dan Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Strain diunggulkan dan diinkubasi secara aerobik pada suhu 37°C selama 24 jam.
Dalam semua kasus pertumbuhan harus memuaskan.
Jamur seperti Candida albicans Complex ATCC 10231 dan Aspergillus niger ATCC 16404 juga dapat digunakan.Pertumbuhan yang baik diharapkan untuk kedua strain.
Kontrol pertumbuhan dan pola hemolisis trypticasein soy agar dilengkapi dengan darah
Strain berikut dapat digunakan untuk memverifikasi berfungsinya agar darah yang dibuat dengan bahan dasar ini: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 dan Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.
Mereka diunggulkan dan diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroaerofilisitas selama 24 jam.
Dalam semua kasus, pertumbuhan harus memuaskan, dengan mempertimbangkan bahwa beta-hemolisis (lingkaran cahaya di sekitar koloni) harus diamati pada S. pyogenes dan hemolisis alfa ( halo kehijauan di sekitar koloni) harus diamati pada kedua galur S. pneumoniae . koloni).
Referensi
- Kontributor Wikipedia. Triptikase Saya adalah agar-agar. Wikipedia, ensiklopedia gratis. 17 Desember 2018, 15:47 UTC. Tersedia di: https://en.wikipedia.org
- Laboratorium Britannia. agar kedelai triptein. 2015.Tersedia di: britanialab.com
- Laboratorium Neogen. Agar kedelai triptik. Tersedia di: foodsafety.neogen.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Argentina. Editorial Panamericana SA
- Laboratorium BD. Trypticase Saya Agar. 2014.Tersedia di: .bd.com
