Rata – rata Cary Blair adalah agar semipadat, digunakan untuk pengangkutan dan konservasi sampel biologis yang mengandung patogen usus, mikroorganisme, dan labil anaerobik. Seperti semua alat transportasi, fungsinya adalah untuk menjaga sampel dalam kondisi optimal sampai dibudidayakan. Mikroorganisme patogen yang ada, serta mikrobiota yang menyertainya, harus tetap hidup, tetapi tanpa meningkatkan populasinya.
Medium Cary Blair merupakan hasil perubahan formulasi Stuart Transport Medium. Modifikasi dilakukan pada tahun 1964 dan terdiri dari penggantian sistem pengatur pH (gliserofosfat) dengan buffer anorganik fosfat.
A. Kultur dengan Medium Cary Blair B. Kolektor Feses dengan Medium Cary Blair. Sumber: A. Video Meganhow, dapatkan kultur luka 2011 youtube.com B. Pengguna: Mattes [Domain publik]
Reformulasi diperlukan karena penciptanya menyadari bahwa gliserofosfat setelah waktu tertentu dapat dimetabolisme oleh beberapa bakteri saprofit. Ketika mereka berkembang biak, mereka tumpang tindih dengan patogen yang ada.
Perubahan lainnya adalah penghapusan metilen biru, serta penyesuaian kembali pH menuju alkalinitas (pH 8,4). Semua perubahan ini meningkatkan efisiensi sarana transportasi.
Awalnya media Cary Blair digunakan untuk pemeliharaan patogen usus, seperti Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae dan Campylobacter sp.
Namun, kemanjuran dalam melestarikan kelangsungan hidup patogen yang menuntut dan labil telah terlihat kemudian, seperti: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae dan beberapa bakteri anaerob .
Indeks artikel
Dasar
Medium Cary Blair mengandung natrium klorida, natrium tioglikolat, dinatrium fosfat, kalsium klorida, dan agar.
Natrium klorida menjaga keseimbangan osmotik medium, dinatrium fosfat dan kalsium klorida menyeimbangkan pH. Untuk bagiannya, natrium tioglikolat mempertahankan potensi reduksi oksidasi yang rendah, sedangkan sebagian kecil agar-agar memberikan konsistensi semipadat.
Media Cary Blair tidak mengandung zat gizi, karena fungsi dari media transportasi adalah untuk menjaga sampel tanpa mengalami perubahan dalam hal kelembaban dan beban mikroba; yaitu, menghindari dehidrasi sampel sambil menjaga viabilitas dan jumlah mikroorganisme yang ada.
Terakhir, pH yang sedikit basa mencegah kematian mikroorganisme oleh keasaman, terutama Vibrios yang sangat sensitif terhadap asam.
Persiapan
Media Cary Blair tersedia secara komersial sebagai perangkat siap pakai khusus. Sistem transportasi ditutupi oleh kantong plastik Peel Pack. Di dalamnya berisi swab untuk mengumpulkan sampel dan tabung wadah untuk media semi-padat Cary Blair.
Juga di pasar ada rumah komersial yang memasok media dehidrasi untuk persiapannya di laboratorium.
Untuk melakukan ini, timbang 13,2 g media dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling. Panaskan dan kocok preparat sampai benar-benar larut. Distribusikan media ke dalam tabung reaksi berpenutup ulir (Bakelite).
Kukus tabung selama 15 menit. Biarkan dingin dan simpan pada suhu kamar sampai digunakan.
Medium Cary Blair yang tidak diinokulasi dapat disimpan secara optimal hingga 18 bulan pada suhu kamar.
PH media harus disesuaikan menjadi 8,4 ± 0,2. Warna media yang disiapkan adalah krem, dengan opalescence tertentu.
Menggunakan
Jenis sampel
Media Cary Blair digunakan bila tinja, usap dubur, dan usap vagina tidak dapat segera diproses.
Bila tidak ada sarana transportasi yang tersedia, sampel dapat disimpan pada -70 ° C.
Contoh
Usap diresapi dengan sampel dan dimasukkan ke dalam media Cary Blair, tanpa mencapai bagian bawah.
Identifikasi sampel
Media Cary Blair harus memiliki label tempat data dasar ditempatkan, seperti: nama depan dan belakang pasien, nomor identifikasi sampel, sumber pengambilan sampel, dokter yang merawat, tanggal dan waktu pengambilan sampel. , diagnosis dugaan, pengobatan antibiotik.
Transfer
Tertutup rapat dan diangkut pada suhu kamar untuk sampel tinja . Sedangkan untuk sampel vagina yang mencari mikroorganisme anaerob, disarankan untuk mengangkut sampel pada suhu 4°C.
Dalam semua kasus, waktu transfer yang disarankan adalah 4-6 jam, dengan maksimum 24 jam.
Jika Campylobacter jejuni dicurigai dalam sampel tinja dan ini tidak dapat diproses dalam waktu 24 jam, penyimpanan dalam media Cary Blair pada suhu 4 ° C dianjurkan.
Investigasi yang dilakukan pada alat transportasi Cary Blair
Beberapa penelitian menunjukkan bahwa media Cary Blair dapat tetap hidup bagi mikroorganisme enteropatogen genus Shigella dan Salmonella hingga 49 hari setelah pengambilan sampel.
Sementara itu, Vibrio cholerae, patogen usus penting lainnya, mampu bertahan selama 22 hari, sedangkan Yersinia pestis (agen penyebab penyakit pes dan pneumonia) dapat pulih setelah 75 hari.
Namun, terlepas dari daya tahan yang ditunjukkan dalam hal pemulihan mikroorganisme ini, direkomendasikan agar sampel yang diambil diangkut dalam media Cary Blair ke laboratorium secepat mungkin.
Demikian juga, setelah sampel mencapai laboratorium, benih harus segera disemai di media kultur masing-masing.
Di sisi lain, media Cary Blair, selain berguna untuk pengangkutan mikroorganisme fakultatif, juga direkomendasikan untuk sampel yang mengandung patogen anaerob.
Dalam hal ini, DeMarco dan kolaborator pada tahun 2017 melakukan penelitian berjudul: Kelangsungan hidup mikroorganisme vagina dalam tiga sistem transportasi yang tersedia secara komersial .
Mereka menunjukkan bahwa Media Transportasi Cary Blair adalah media transportasi terbaik untuk pelestarian dan pemulihan mikroorganisme anaerobik vagina. Demikian juga, mereka menunjukkan bahwa tingkat pemulihan tertinggi dicapai ketika suhu transfer adalah 4 ° C.
Oleh karena itu, disimpulkan bahwa suhu transportasi untuk usapan vagina (mikroorganisme anaerob) harus pada 4 ° C. Sedangkan untuk sampel feses yang mencari mikroorganisme fakultatif, suhu yang ideal adalah suhu kamar.
QA
Strain yang dikenal sebagai Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae dan Campylobacter sp. Dapat digunakan untuk mengevaluasi kontrol kualitas media transportasi Cary Blair .
Media diinokulasi dengan strain yang dipilih dan disimpan pada suhu kamar selama 24 jam. Mereka kemudian ditaburkan di media kultur yang sesuai. Dalam semua kasus, pemulihan yang memuaskan dari mikroorganisme yang bersangkutan diharapkan.
Referensi
- DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, dkk. Kelangsungan hidup mikroorganisme vagina dalam tiga sistem transportasi yang tersedia secara komersial. anaerob . 2017; 45: 44-49.
- Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Perbandingan Media Pengawetan untuk Penyimpanan Sampel Feses. Mikrobiol J Clin . sembilan belas sembilan puluh lima; 33 (8): 2176–2178.
- Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Perbandingan media pengawetan dan kondisi pembekuan untuk penyimpanan spesimen feses. Mikrobiol J Med . 1989; 28 (2): 151-4.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
- Laboratorium Conda Pronadisa. Setengah Cary Blair. Tersedia di: condalab.com
- Laboratorium Metrik. Cary Blair. Tersedia di: metrixlab.mx
