agar manitol garam atau garam manitol adalah selektif medium padat dan budaya diferensial. Itu dibuat oleh Chapman untuk isolasi kokus Gram-positif patogen, terutama Staphylococcus aureus .
Namun, juga berguna untuk mengisolasi Staphylococus epidermidis, yang terkadang dapat hadir sebagai patogen oportunistik, dan Staphylococcus saprophyticus, patogen saluran kemih yang dikenal, di antara spesies lainnya.
A. Fiola dengan media agar manitol asin. B. Pelat agar manitol asin diunggulkan dengan strain bakteri manitol fermentasi dan non-fermentasi. Sumber: A dan B: Foto diambil oleh penulis MSc. Marielsa Gil.
Beberapa Enterococcus mampu tumbuh pada media ini, serta batang pembentuk spora Gram-positif tertentu.
Media ini sangat berguna dalam analisis sampel klinis, tetapi juga digunakan dalam studi mikrobiologi makanan dan dalam kontrol kualitas produk industri, seperti kosmetik, obat-obatan, dan lain-lain.
Salted Mannitol Agar terdiri dari ekstrak dan pepton dari daging sapi, triptein, manitol, natrium klorida , fenol merah dan agar.
Indeks artikel
Dasar
Agar manitol bersifat selektif karena konsentrasi garamnya yang tinggi. Salinitas bertindak sebagai zat penghambat dan mencegah pertumbuhan bakteri Gram negatif.
Ini juga berbeda karena adanya manitol karbohidrat dan indikator pH fenol merah. Dari sini, bakteri yang mampu memfermentasi manitol menghasilkan asam, mengasamkan media, mengubah koloni dan media menjadi kuning.
Di sisi lain, koloni yang tidak memfermentasi manitol tumbuh di media yang mengambil nutrisi yang disediakan oleh ekstrak daging dan pepton dan triptein. Dari sana bakteri mengekstrak karbon, nitrogen, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pertumbuhannya.
Koloni dalam hal ini bisa menjadi merah muda lemah atau kuat, dan mediumnya tetap berwarna sama atau berubah menjadi fuchsia.
Agar adalah zat yang memberikan konsistensi pada medium.
Persiapan
Untuk menyiapkan satu liter agar manitol asin, 111 g media dehidrasi dari perusahaan komersial lebih disukai ditimbang dan dilarutkan dalam 1000 ml air suling, menggunakan labu.
Panas diterapkan dengan sering mengaduk media untuk meningkatkan proses pembubaran. Rebus selama satu menit.
Labu dimasukkan ke dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit.
Pada akhir waktu, keluarkan labu dari autoklaf, diamkan dan sajikan antara 15 hingga 20 ml pada cawan Petri steril saat suhu sekitar 50 hingga 55 ° C.
Diperbolehkan untuk memadat, memesan secara terbalik di plak dan disimpan di lemari es sampai digunakan. Sebelum menyemai sampel, tunggu piring mencapai suhu kamar.
Pelat disemai dengan cara digores atau dengan penyemaian permukaan dengan spatula drigalski. PH akhir dari media yang disiapkan harus 7,4 ± 0,2
Warna media yang dikeringkan adalah krem muda dan warna media yang disiapkan adalah oranye-merah.
Kegunaan
Karena selektivitasnya yang tinggi, media ini sangat ideal untuk menabur sampel dengan flora campuran di mana Anda ingin mencari keberadaan Staphylococus aureus , sebagai patogen utama genus ini.
Dalam pengertian ini, salah satu kegunaannya yang paling sering adalah dalam analisis mikrobiologi eksudat faring dan sampel sekret hidung, terutama untuk mendeteksi pembawa S. aureus tanpa gejala .
Beberapa negara telah menerapkan analisis ini sebagai persyaratan wajib bagi orang yang ingin bekerja sebagai penjual makanan.
Pengendalian ini mencegah orang yang menjadi pembawa S. aureus , sehingga terhindar dari keracunan makanan secara masif , akibat konsumsi makanan yang terkontaminasi enterotoksin stafilokokus.
Itu juga dapat dimasukkan dalam penyemaian infeksi luka, kultur darah, CSF, lavage bronchoalveolar, antara lain.
Agar manitol asin berguna untuk mengisolasi kembali koloni dari kultur urin dari agar CLED atau agar darah yang Gramnya menunjukkan kokus Gram positif dalam kelompok.
Ini juga berlaku dalam analisis mikrobiologis makanan, air minum, tanah, di antara aplikasi lainnya.
QA
Setelah batch piring dengan agar manitol asin telah disiapkan, disarankan untuk melakukan kontrol kualitas. Strain kontrol disemai untuk menunjukkan apakah ada pertumbuhan atau tidak.
Strain Staphylococcus aureus yang diketahui dapat digunakan sebagai kontrol positif . Itu harus tumbuh dengan memuaskan mengembangkan koloni kuning, dan media juga berubah warna yang sama.
Demikian juga, akan lebih mudah untuk memasukkan strain Staphylococcus epidermidis yang diketahui . Itu harus tumbuh dengan memuaskan dengan mengembangkan koloni merah muda, dan medianya tetap berwarna sama atau menjadi lebih gelap menjadi merah muda yang lebih kuat.
Sebagai kontrol negatif, digunakan galur yang tidak boleh tumbuh pada media ini. Misalnya, galur Escherichia coli atau Klebsiella pneumoniae yang diketahui dapat ditumbuhkan . Hasil yang diharapkan adalah penghambatan total, yaitu tidak ada pertumbuhan.
Selain itu, piring yang tidak diinokulasi harus diinkubasi. Di dalamnya seharusnya tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.
Penting agar pelat tidak digunakan jika ada tanda-tanda kerusakan, seperti kontaminasi, dehidrasi, perubahan warna, dan lain-lain.
Pikiran terakhir
Saat menggunakan media agar manitol asin, ada beberapa aspek penting yang perlu diperhatikan:
– Adanya pertumbuhan koloni berwarna kuning tidak menunjukkan bahwa itu adalah Staphylococcus aureus. Harus diingat bahwa beberapa strain Enterococcus mampu tumbuh dalam media ini dan memfermentasi manitol, serta batang Gram-positif pembentuk spora tertentu.
Oleh karena itu, penting untuk melakukan Gram pada koloni dan uji katalase.
-Di sisi lain, harus dipertimbangkan bahwa spesies Staphylococcus lain selain aureus juga mampu memfermentasi manitol. Oleh karena itu, penting untuk mensubkultur koloni ke kaldu nutrisi untuk diambil dari sana dan melakukan uji koagulase.
Di antara spesies Staphylococcus yang penting secara klinis bagi manusia yang memfermentasi manitol adalah: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum , antara lain.
Orang lain dapat memberikan reaksi yang bervariasi, yaitu terkadang positif dan terkadang negatif. Beberapa diantaranya adalah S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius .
-Tidak dianjurkan untuk mengambil koloni langsung dari agar manitol untuk melakukan uji koagulase, karena konsentrasi garam yang tinggi pada media dapat mengganggu hasil.
-Terakhir, direkomendasikan untuk menginkubasi cawan yang diberi manitol asin hingga 48 jam, karena beberapa galur S. aureus dapat memfermentasi manitol secara perlahan, meskipun hal ini tidak terlalu sering.
Referensi
- Laboratorium Britannia. Agar manitol asin. 2015.Tersedia di: britanialab.com
- “Agar manitol asin.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 31 Okt 2018, 19:08 UTC. 17 Januari 2019, 20:55, tersedia di: es.wikipedia.org.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. (edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Argentina. Editorial Panamericana SA
- Laboratorium BD. Agar Garam Mannitol BD. 2013. Tersedia di: bd.com.
