agar Salmonella Shigella juga dikenal sebagai SS agar adalah selektif dan menengah diferensial cararat, terutama dirancang untuk isolasi bakteri enteropathogenic dari genera Salmonella dan Shigella, kedua sampel lingkungan seperti klinis.
Agar SS memiliki komposisi yang kompleks; Itu terdiri dari ekstrak daging, pepton, laktosa, garam empedu, natrium sitrat, natrium tiosulfat, besi sitrat, agar, merah netral, hijau terang dan air suling . Mengingat selektivitasnya yang tinggi, sampel dengan flora campuran yang melimpah dapat ditaburkan.
SS agar dengan koloni Salmonella sp. Sumber: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)], dari Wikimedia Commons
Di laboratorium mikrobiologi, media Salmonella-Shigella banyak digunakan untuk menyelidiki keberadaan Salmonella dan Shigella dalam sampel tinja diare, air limbah, air minum dan makanan.
Kadang-kadang perlu menggunakan kaldu pra-pengayaan (kaldu laktosa) dan kaldu pengayaan (kaldu selenit sistin) untuk memulihkan strain Salmonella.
Langkah-langkah ini diperlukan ketika keberadaan Salmonella dalam jumlah yang sangat rendah diduga, atau di mana strain dapat disalahgunakan oleh proses produksi industri, terutama makanan olahan. Juga disarankan untuk memperkaya sampel tinja dari pasien yang telah diobati dengan antibiotik.
Selanjutnya, kaldu yang diperkaya dapat diunggulkan pada agar Salmonella-Shigella dan media serupa lainnya, seperti agar xylose, lysine deoxycholate (XLD) dan agar enterik Hektoen (HE).
Indeks artikel
Dasar
Setiap komponen media kultur Salmonella-Shigella memiliki fungsi tertentu, dan campuran secara keseluruhan memberikan sifat-sifat yang menjadi cirinya.
Kekuatan nutrisi
Ekstrak daging dan pepton (dicerna dengan kasein dan jaringan hewan) menyediakan nutrisi yang dibutuhkan (nitrogen, karbon, dan vitamin) untuk perkembangan mikroorganisme yang mampu menoleransi komponen lainnya.
Konsistensi
Agar-agar bertugas memberikan konsistensi padat pada medium.
Selektif
Medium ini sangat selektif karena mengandung garam empedu, natrium sitrat, dan hijau terang. Oleh karena itu, menghambat pertumbuhan semua bakteri Gram positif dan sebagian besar batang Gram negatif, termasuk beberapa koliform.
Sementara bakteri dari genus Salmonella dan beberapa strain Shigella mendukung senyawa ini.
Terutama, genus Salmonella sangat resisten terhadap garam empedu, sedemikian rupa sehingga mereka mampu hidup di kantong empedu beberapa pasien pembawa yang terus-menerus mengeluarkan bakteri dalam tinja mereka.
Diferensial
Laktosa adalah karbohidrat yang dapat difermentasi yang membantu membedakan galur yang memfermentasi laktosa dari yang tidak berfermentasi. Sifat ini dibuktikan dengan adanya indikator pH yang dalam medium ini adalah phenol red.
Strain fermentasi laktosa memberikan koloni merah, sedangkan strain non-fermentasi tidak berwarna. Karakteristik ini penting, karena Salmonella dan Shigella tidak memfermentasi laktosa.
Di sisi lain, media ini mengandung natrium tiosulfat sebagai sumber sulfida dan besi sitrat sebagai sumber zat besi. Kedua senyawa tersebut mampu membedakan bakteri yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida. Ini bereaksi untuk membentuk endapan sulfida besi hitam yang terlihat dan tidak larut.
Sifat ini ditemukan pada beberapa galur genus Salmonella. Biasanya koloni mereka datar tidak berwarna dengan titik hitam di tengahnya. Sisa Salmonella tidak menghasilkan H 2 S dan berkembang sebagai koloni tidak berwarna.
Di sisi lain, koloni genus Shigella datar tidak berwarna tanpa menghitam.
Persiapan
Media ini sangat sederhana untuk disiapkan.
Timbang 63 g media komersial dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling. Panaskan larutan dan aduk. Campuran dapat mendidih hingga beberapa menit.
Media ini tidak boleh diautoklaf. Setelah larut, disajikan langsung di piring steril tunggal atau ganda.
Saat mengeras, mereka diatur secara terbalik dalam plak dan disimpan di lemari es (2-8 ° C) sampai digunakan.
Setelah persiapan, media harus tetap pada pH 7,2 ± 0,2 dan dengan warna oranye-merah.
Penting untuk membiarkan pelat memanas sebelum menyemai sampel. Sampel asli dapat ditaburkan secara langsung, mengeluarkan bahan pada bagian agar-agar dan kemudian digores karena kelelahan dari sana.
Jika menggunakan kaldu yang diperkaya, tuangkan sebagian dari kaldu selenite dan tabur dengan spatula drigalski.
Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam secara aerobiosis.
Harus diperhitungkan bahwa jumlah gram yang akan ditimbang dan pH akhir media dapat bervariasi dari satu rumah komersial ke rumah komersial lainnya. Basis tengah selalu membawa indikasi untuk persiapannya.
Menggunakan
Hal ini sering digunakan dalam analisis kultur tinja dan dalam studi mikrobiologi air limbah, air minum dan sampel makanan.
Pelat ganda sering disiapkan, di satu sisi agar Salmonella-Shigella ditempatkan dan di sisi lain agar XLD.
Keterbatasan
-Beberapa galur Shigella tidak tumbuh di media ini. Oleh karena itu, tidak direkomendasikan untuk isolasi primer genus ini.
-Tidak setiap koloni transparan dengan pusat hitam menunjukkan Salmonella; Tes biokimia harus dilakukan untuk membuat identifikasi yang benar, karena koloni beberapa strain Proteus tidak dapat dibedakan dari Salmonella.
-Media yang mengalami dehidrasi harus berhati-hati terhadap paparan lingkungan, karena sangat higroskopis. Oleh karena itu, harus disimpan di lingkungan yang kering dan tertutup rapat. Terbuka untuk waktu yang sangat singkat.
-Seiring waktu garam empedu dalam media dapat mengendap, membentuk gambar yang mirip dengan tikar di dalam agar-agar, tetapi ini tidak mempengaruhi hasil.
-Beberapa galur Shigella dapat memfermentasi laktosa secara perlahan.
QA
Untuk membuktikan bahwa media bekerja dengan benar, disarankan untuk menanam galur kontrol yang diketahui atau bersertifikat dan mengamati apakah pertumbuhannya memenuhi karakteristik yang diharapkan.
Untuk ini, strain E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium atau Enterococcus faecalis dapat digunakan.
Hasil yang diharapkan adalah:
Escherichia coli ——————————- koloni cembung berwarna merah muda .
Enterobacter dan Klebsiella —————— koloni besar dan mukoid merah atau merah muda.
Shigella flexneri ——————————- koloni datar transparan atau tidak berwarna.
Salmonella typhimurium —————— koloni tidak berwarna dengan pusat hitam.
Enterococcus faecalis ———————- penghambatan total.
Referensi
- Laboratorium Difco Francisco Soria Melguizo. Agar Salmonella-Shigella. 2009.Tersedia di: f-soria.es
- Laboratorium BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013.Tersedia di: bd.com
- Laboratorium Britannia. Salmonella Shigella Agar. 2015.Tersedia di: britanialab.com
- Diagnostik Valtek. Agar Salmonella-Shigella (SS Agar). 2010. Tersedia di: andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
