media Stuart adalah agar semipadat atau kaldu tanpa nutrisi, digunakan untuk pengangkutan sampel biologis. Tujuannya adalah untuk menjaga agar strain yang ada dalam sampel tetap hidup selama waktu tertentu, tetapi tanpa meningkatkan populasi mikroba.
Itu dibuat oleh Moffet, Young, dan Stuart pada tahun 1948 dan kemudian dimodifikasi oleh Toshach dan Patsula. Ini terdiri dari natrium gliserofosfat, natrium tioglikolat, kalsium klorida, dan agar-agar. Yang terakhir hadir dalam media semi-padat dan tidak ada dalam cairan. Beberapa laboratorium menambahkan metilen biru ke dalamnya.
Culturette dengan transportasi Stuart. Sumber: Oleh: CDC / Dr. Gilda Jones, Atas perkenan: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat
Mereka umumnya digunakan ketika tidak mungkin untuk menabur sampel segera. Dalam hal ini, sampel ditempatkan di media transportasi, sementara itu dipindahkan ke laboratorium yang akan memproses kultur.
Dengan cara ini, dijamin bahwa mikroorganisme yang ada tetap hidup sampai mereka diinokulasi dalam media kultur yang sesuai.
Awalnya, penggunaannya dimaksudkan untuk mengangkut sampel uretra atau vagina di mana diduga adanya Neisseria gonorrhoeae . Belakangan, mereka menyadari bahwa kegunaannya bisa lebih luas.
Media Stuart ternyata sangat efisien dalam pengawetan mikroorganisme labil dan rewel seperti Neisseria meningitidis , Haemophilus influenzae , Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae , Corynebacterium diphteriae , Bordetella pertusis, antara lain. Selain mikroorganisme lain yang tidak mengganggu seperti Enterobacteria.
Media Stuart pada dasarnya mencegah pengeringan sampel, menjaga keseimbangan osmotik dan mempertahankan mikroorganisme pada pH yang ideal. Di sisi lain, secara strategis media ini tidak mengandung nutrisi, sehingga mencegah mikroorganisme berkembang biak.
Di pasaran ada alat transportasi sampel khusus yang berisi alat transportasi ini atau lainnya, yang disebut culturette. Mereka juga dapat disiapkan di laboratorium.
Indeks artikel
Dasar
Tujuan dari media transportasi Stuart adalah untuk menjaga sampel sedekat mungkin dengan kondisi aslinya sampai mereka diproses.
Natrium gliserofosfat dan kalsium klorida merupakan sistem penyangga yang bekerja dengan menjaga pH dan osmolaritas.
Sementara itu, natrium tioglikolat bertindak sebagai zat pereduksi dan dalam hal mengandung agar-agar, memberikan konsistensi semi-padat, untuk menunda oksigenasi medium. Akhirnya, metilen biru adalah indikator oksidasi, yaitu mendeteksi keberadaan oksigen.
Medium semi-padat dengan indikator redoks sangat ideal untuk mengangkut sampel yang diduga terdapat bakteri anaerob.
Karakteristik alat transportasi
Media Stuart, seperti semua alat transportasi, memenuhi karakteristik tertentu, termasuk:
-Mempertahankan strain mikroba yang ada tanpa berkembang biak.
-Tidak mengandung nutrisi; Senyawanya ditujukan untuk menjaga sampel terhidrasi, di bawah kondisi pH dan osmolaritas yang memadai.
-Menghambat autolisis beberapa mikroorganisme halus, seperti Pneumococcus.
-Penggunaannya bersifat sementara, tidak boleh terlalu lama.
Persiapan
Medium Stuart semi-padat dengan indikator redoks
Persiapan rumah
Bahan
Natrium gliserofosfat 10 gr
Natrium tioglikolat 1,0 gr
Kalsium klorida 0,1 gr
Metilen biru 0,002 gr
Agar-agar 3 gr
Air suling 1 L
Campur komponen dan panaskan sampai benar-benar larut. Tuang ke dalam tabung atau penyeka khusus. Mereka dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada 121ºC selama 15 menit. Biarkan tabung mendingin dalam posisi tegak (berbentuk balok). Simpan pada suhu kamar.
Persiapan dengan media komersial
Timbang 14,1 g media dalam 1 liter air suling. Panaskan aduk sering sampai benar-benar larut, bisa direbus. Sisa prosedur seperti yang sudah dijelaskan.
Media yang dikeringkan berwarna krem dan permukaannya harus berwarna biru. Hal ini disebabkan adanya metilen biru.
PH media harus disesuaikan dengan 7,4 ± 0,2
Medium Stuart Modifikasi Cair (buatan sendiri)
Bahan
Natrium gliserofosfat 10 gr
Natrium tioglikolat 1 gr
Kalsium klorida dihidrat 0,1 gr
Air suling 1000 ml
Ini memiliki bahan yang sama dengan semi-padat, tetapi tidak memiliki agar-agar atau metilen biru. Dalam hal ini, komponen dicampur tanpa pemanasan dan 0,5 ml didistribusikan dalam tabung 16 x 125 mm dengan tutup ulir.
Ini disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 10 menit. Untuk pengambilan sampel, usap dakron harus digunakan jika sampel untuk PCR atau rayon jika untuk kultur.
Tabung disimpan pada suhu kamar.
Kegunaan
Secara komersial ada alat khusus untuk mengangkut sampel yang disebut culturette; Alat ini berupa tabung memanjang dan tipis yang didalamnya terdapat swab dan pada ujungnya terdapat ruas yang berisi medium Stuart semi padat atau cair.
Alat dibuka dan sampel diambil dengan swab. Kemudian dimasukkan kembali ke dalam tabung sampai ujung swab dimasukkan ke dalam media transpor semi-padat; beberapa membawa spons poliuretan yang diresapi dengan media Stuart cair, yang dengannya sampel diawetkan dengan menjaganya tetap basah.
Jika diduga adanya mikroorganisme halus, kapas dengan arang harus digunakan untuk mengumpulkan sampel.
Sampel yang dapat diambil dengan swab atau swab dan dipindahkan dalam media ini adalah eksudat faring, usap rektal, dan berbagai sekret, antara lain: vagina, uretra, luka, okular, telinga, dan abses.
Selama pemindahan sampel dalam media transportasi ke laboratorium, kondisi lingkungan yang ekstrim (terlalu dingin atau terlalu panas) harus dihindari. Perubahan mendadak pada tekanan atmosfer juga harus dihindari.
Waktu di mana media mampu menjaga mikroorganisme tetap hidup akan tergantung pada strain yang bersangkutan. Misalnya, untuk mikroorganisme dari genus Neisserias dan Haemophilus, mereka dapat bertahan hingga 24 jam, tetapi strain seperti Salmonella atau Shigella dapat bertahan selama berhari-hari bahkan berminggu-minggu.
Jika diperkirakan pemrosesan sampel dapat memakan waktu lebih dari 4 hari, sebaiknya sampel dibekukan pada -70 ° C.
Identifikasi sampel di sarana transportasi
Alat angkut atau kultur komersial yang disiapkan harus memiliki label di mana informasi berikut akan ditempatkan:
Nama depan dan belakang pasien: menghindari kebingungan sampel.
Nomor identifikasi: akan lebih mudah untuk menyimpan pesanan di tempat kerja.
Sumber pengumpulan sampel: membantu ahli bakteriologi untuk memilih media kultur yang sesuai.
Dokter yang hadir: Kadang-kadang perlu untuk kemungkinan konsultasi.
Tanggal dan waktu pengambilan sampel: penerimaan atau penolakan sampel perlu dilakukan sesuai dengan waktu yang telah berlalu antara pengambilan sampel dan penerimaan di laboratorium.
Informasi lain yang akan sangat berguna untuk dilampirkan adalah:
Diagnosis dugaan: memandu penambahan media kultur khusus sesuai dengan diagnosis yang dicurigai.
Pengobatan antibiotik: berguna untuk dilampirkan pada antibiogram.
Semua informasi ini sangat penting untuk memastikan pemrosesan sampel yang tepat.
QA
Untuk mengevaluasi kinerja media Stuart, strain yang diketahui dapat diinokulasi dan disimpan pada suhu 25 ° C, seperti: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
Dalam semua kasus, diharapkan untuk memulihkan mikroorganisme yang bersangkutan, diawetkan selama 24 jam.
Di sisi lain, strain lain dapat digunakan seperti: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Escherichia coli ATCC 11775.
Dalam semua kasus, pemulihan yang melimpah diharapkan hingga 96 jam.
Keterbatasan
Beberapa penelitian memastikan bahwa gliserofosfat yang ada dalam media Stuart dapat dimetabolisme oleh beberapa koliform, di antara bakteri Gram negatif lainnya, dan oleh karena itu berkembang biak dalam media ini.
Risiko ini meningkat semakin lama pemrosesan sampel tertunda. Demikian juga, paparan medium Stuart ke suhu tinggi selama pengangkutan mempengaruhi hal ini.
Referensi
- “Media transportasi (mikrobiologi).” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 13 Apr 2018, 10:36 UTC. Apr 1, 2019.Tersedia di: es.wikipedia.org
- Laboratorium Microkit: Media Kultur. Transportasi Stuart. Tersedia di: Tersedia di: Medioscultivo.com
- LabLisan. Alat transportasi Stuart. Tersedia di: lablinsan.cl
- MD Ilmiah. Keuntungan memiliki sarana transportasi mikrobiologi Stuart. Tersedia di: mdmcientifica.com
- Laboratorium Metrik. Stuart. 2017.Tersedia di: metrixlab.mx
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
