Loop bakteriologis adalah instrumen kerja yang digunakan oleh ahli mikrobiologi untuk menabur kultur mikroba (bakteri atau jamur). Ini mungkin instrumen yang paling banyak digunakan oleh para profesional ini.
Penggunaannya tampak sederhana, tetapi pada kenyataannya membutuhkan banyak pelatihan. Sebelum mulai disemai, loop harus disterilkan dalam pembakar Bunsen, kemudian diambil inokulum mikroba yang dapat berasal dari kultur cair atau kultur padat.
Jenis loop bakteriologis. Sumber: Tidak ada penulis yang dapat dibaca mesin yang disediakan. diasumsikan (berdasarkan klaim hak cipta). [CC BY-SA 3.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/)]
Setelah inokulum diambil, dapat disimpan dalam media cair atau diunggulkan pada media padat. Setelah setiap prosedur loop disterilkan lagi. Pegangan juga cocok untuk membuat noda mikroba pada slide.
Loop bakteriologis memiliki banyak nama, termasuk: loop atau loop platinum, loop inokulasi atau loop penyemaian, namun nama aslinya adalah loop Kohle.
Bahan yang digunakan untuk membuat pegangan umumnya adalah paduan nikel-kromium (nikrom) atau juga platinum. Varietas lain yang tersedia di pasaran adalah loop bakteriologis sekali pakai plastik.
Di sisi lain, ada beberapa jenis loop bakteriologis, masing-masing memenuhi fungsi dalam tugas yang dilakukan oleh ahli mikrobiologi. Pilihan pegangan akan tergantung pada apa yang perlu dilakukan.
Misalnya, untuk melakukan striatum dengan penipisan untuk mengisolasi mikroorganisme, loop platinum digunakan, yang berakhir dengan cincin tertutup, terlepas dari apakah dikalibrasi atau tidak.
Padahal, jika ingin menabur sampel urin, di mana penting untuk mengukur CFU, perlu menggunakan loop terkalibrasi. Demikian juga, untuk menginokulasi tes biokimia , yang perlu ditaburkan dengan tusukan, loop jarum sangat penting. Adalah penting bahwa pegangan ditangani oleh personel terlatih.
Indeks artikel
Karakteristik
Loop bakteriologis terdiri dari dua ekstrem. Salah satu ujungnya sesuai dengan pegangan atau alasnya, sedangkan ujung lainnya adalah pegangan itu sendiri.
Menangani alas atau pegangan
Basis berfungsi untuk mencengkeram pegangan selama penanganan. Biasanya logam, tetapi memiliki insulator panas untuk mencegah operator dari terbakar ketika ujung pegangan disterilkan pada korek api. Ukurannya sekitar 20 cm, meskipun bisa lebih panjang. Ini memiliki benang untuk menyesuaikan pegangan.
Menangani
Ini adalah ujung fungsional, yaitu bagian yang bersentuhan dengan mikroorganisme dan dengan media kultur. Ini terdiri dari kawat halus yang dimasukkan ke dasar.
Pegangan dapat dibuat dari nichrome atau platinum, oleh karena itu kadang-kadang disebut pegangan platinum. Panjangnya sekitar 6,5 cm dan memiliki ukuran sekitar 0,20 mm. Pegangan dengan pegangan bisa berukuran 26,5 cm. Pengukuran dapat bervariasi dari produsen ke produsen.
Jenis
Ada beberapa jenis loop bakteriologis dan masing-masing memiliki kegunaan khusus. Jenis-jenis gagang adalah sebagai berikut: gagang berbentuk cincin terkalibrasi, gagang berbentuk cincin tidak terkalibrasi, gagang lurus atau jarum, gagang bersudip, gagang berbentuk “L” dan gagang berujung runcing.
Di sisi lain, pegangannya bisa permanen atau sekali pakai. Mereka untuk penggunaan permanen disterilkan dalam korek api, dapat digunakan kembali dan sangat tahan lama. Sementara sekali pakai steril dari pabrik, mereka hanya digunakan sekali dan dibuang.
Kegunaan
Pegangan cincin, tidak dikalibrasi
Ini adalah pegangan yang paling sering digunakan di laboratorium mikrobiologi. Ini digunakan untuk mengambil inokulum dari suspensi mikroba (medium cair) atau sebagian koloni (medium padat), untuk disemai di media kultur lain, baik uji biokimia atau media yang lebih diperkaya atau selektif, tergantung kasusnya. . Hal ini juga berguna untuk membuat noda mikroba pada slide.
Dengan jenis loop ini, inokulum awal dapat digores. Itu juga dirancang agar meluncur dengan mulus di atas agar-agar, tanpa merusaknya. Tentu saja, ini membutuhkan staf yang terlatih untuk menangani teknik penyemaian, menerapkan gaya dan gerakan yang benar untuk membuat pergoresan yang baik.
Berbagai teknik penyemaian dapat dilakukan dengan pegangan ini. Contoh media padat dalam cawan petri biasanya diunggulkan sampai habis (ada beberapa teknik lihat video 1).
Teknik ini bertujuan untuk mendapatkan koloni terisolasi untuk mempelajari dan mengidentifikasinya, terutama jika sampelnya polimikroba, yaitu biakan tidak murni (mengandung lebih dari satu jenis mikroorganisme).
Sebagai gantinya, irisan ditanam dalam zigzag sederhana untuk mendapatkan massa bakteri, dalam hal ini tidak diperlukan untuk mengisolasi koloni.
Terkadang mereka juga digunakan untuk mengambil sampel tertentu. Misalnya, Rojas dan rekannya menggunakan lingkaran bakteriologis untuk mengumpulkan sampel jaringan vagina dari tikus.
Loop bakteriologis dengan ujung cincin, tidak dikalibrasi. Sumber: Pixinio.com
Pegangan berbentuk cincin, dikalibrasi
Pegangan ini, seperti namanya, dikalibrasi untuk mengambil sejumlah suspensi mikroba tertentu. Ini digunakan bila inokulum perlu untuk memenuhi apa yang dibakukan dalam bidang ini.
Misalnya, sangat umum untuk menanam kultur urin. Dalam hal ini, loop terkalibrasi 0,01 ml dan 0,001 ml dapat digunakan.
Perlu dicatat bahwa pegangan yang dikalibrasi memiliki margin kesalahan, yang bervariasi sesuai dengan sudut pengambilan sampel dan ukuran mulut wadah.
Jika loop 0,001 ml ditempatkan dalam posisi vertikal dalam wadah dengan mulut kecil (≤ 7 mm), jumlah yang diambil akan berkurang 50% dari yang diinginkan.
Hal ini terjadi karena semakin kecil diameter mulut wadah maka tegangan permukaan semakin tinggi sehingga gaya adhesi antar (gelas – cair) semakin besar. Hal ini menyebabkan beban cairan yang diambil oleh pegangan menjadi lebih sedikit.
Sedangkan jika diambil pada sudut 45° dalam wadah bermulut lebar (≥ 22 mm), dapat terkumpul 150% lebih banyak dari jumlah yang dibutuhkan. Dalam hal ini, tegangan permukaan lebih rendah dan gaya kohesi kaca/plastik berkurang, sedangkan gaya kohesi cair-cair meningkat.
Karena hal di atas, metode lain untuk kuantifikasi unit pembentuk koloni terkadang lebih disukai untuk kultur urin.
Pegangan lurus atau jarum
Ini juga disebut pegangan ulir. Ini digunakan untuk menginokulasi tes biokimia tertentu, terutama yang perlu diunggulkan dengan teknik tusukan. Contoh, media semi padat yang dibuat dalam bentuk balok, seperti: media SIM, MIO dan O/F.
Selain itu, dalam kasus MIO dan SIM yang mengevaluasi motilitas, tusukan harus dilakukan dengan jarum loop, karena interpretasi motilitas positif terjadi ketika bakteri tumbuh ke arah sisi inokulum awal.
Tes yang diinokulasi dengan loop loop dapat memalsukan hasil (positif palsu). Untuk alasan ini, dalam jenis penyemaian ini, harus diperhatikan bahwa tusukannya unik, dan ketika dilepas, tusukannya keluar ke arah yang sama dengan masuknya.
Tes lain yang harus diunggulkan dengan jarum meskipun disiapkan dalam bentuk baji adalah Kligler. Dalam pengujian ini, oksigen tidak dianjurkan untuk menembus jauh ke dalam agar-agar, karena media yang miskin oksigen diperlukan untuk terjadinya reaksi kimia tertentu. Pegangan ini juga digunakan untuk menyentuh koloni tertentu untuk tujuan subkultur.
Pegangan spatula
Sebagian besar mikroorganisme memberikan koloni yang lunak dan mudah rontok. Namun, ada beberapa agen mikroba yang koloninya keras dan kering, misalnya mikobakteri pada umumnya dan beberapa jamur. Dalam kasus ini, berguna untuk menggunakan gagang spatula.
Pegangan berbentuk “L”
Penggunaannya yang paling sering adalah untuk membunyikan kultur jamur, terutama jamur.
Pegangan ujung tajam
Hal ini berguna untuk mengambil koloni yang sangat kecil yang ada dalam kultur polimikroba, agar dapat mensubkulturnya.
Teknik menabur
Video 1
Sterilisasi pegangan platinum
Pegangan harus disterilkan sebelum dan sesudah digunakan. Untuk mensterilkan lingkaran bakteriologis di pemantik api, lakukan sebagai berikut: pegangan harus ditempatkan di bagian atas api, mengambil posisi vertikal mungkin, sedemikian rupa untuk mensterilkan dari ujung ke atas.
Ketika filamen halus berubah menjadi merah cerah, itu dapat dikatakan steril. Untuk menggunakannya, didinginkan dan diambil sampel yang dipilih. (Lihat video 2).
Sterilisasi loop bakteriologis
Video 2
Referensi
- “Lingkaran Bakteriologis ” Wikipedia, Free Encyclopedia . 23 Juli 2019, 13:31 UTC. 18 Agustus 2019, 22:45. Wikipedia.
- Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Gagang logam yang dikalibrasi untuk ahli mikrobiologi: Alternatif pembuatan nasional. Ayo. Mikrobiol. 2010; 30 (1): 37-42. Tersedia di: ve.scielo.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, dkk. Penentuan efek analgesik ekstrak heksana dari bunga Eupatorium arsenei pada caral tikus nyeri akut. meks Sains. pertanian . 2015; 46 (1): 64-69. Tersedia di: scielo.org
