makan jagung agar adalah medium kultur yang solid, kekuatan gizi rendah, berguna untuk subkultur jamur tertentu dan untuk menunjukkan chlamydospores di alunan kompleks Candida albicans . Dalam bahasa Inggris dikenal dengan Corn Meal Agar.
Media tepung jagung konvensional memiliki komposisi yang sangat sederhana, yaitu mengandung tepung jagung, agar-agar dan air. Karena tingkat nutrisinya yang rendah, sangat ideal untuk digunakan dalam pemeliharaan strain jamur untuk jangka waktu yang cararat, terutama jamur hitam.
A. Representasi grafis dari Kompleks Candida albicans pada agar tepung jagung. B. Klamidospora dari Kompleks Candida albicans terlihat di bawah mikroskop, terbentuk pada agar tepung jagung. Sumber: A. GrahamColm [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0)♡/ B. Oleh: CDC / Dr. William Kaplan, Courtesy: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat.
Sporulasi kompleks Candida albicans disukai dalam media ini, jika 1% dari Tween 80 ditambahkan selama pembuatan agar. Pembentukan klamidospora adalah karakteristik spesies ini dan praktis satu-satunya yang mempengaruhi manusia.
Ada spesies lain yang membentuk klamidospora, tetapi tidak mungkin mempengaruhi manusia, seperti Candida australis, yang ada dalam kotoran penguin, atau C. clausenii, yang merupakan saprofit yang jarang ditemui. Demikian pula, spesies C. stellatoidea dan C. tropicalis dapat membentuk mereka secara khusus.
Di sisi lain, penambahan glukosa ke media tepung jagung mendukung pembentukan pigmen pada strain Trichophytom rubrum.
Penting untuk dicatat bahwa ada jamur yang tidak membentuk hifa atau pseudohifa dalam agar tepung jagung, seperti Cryptococcus neoformans, berbeda dari genera lain.
Agar tepung jagung bisa dibuat sendiri di laboratorium atau bisa juga digunakan media komersial.
Indeks artikel
Dasar
Tepung jagung adalah substrat, agar-agar adalah agen pemadatan, dan air adalah pelarut.
Agar tepung jagung dapat dilengkapi dengan tween 80 (sorbitan monooleate atau polisorbat poliester 80). Senyawa ini mengurangi tegangan permukaan media karena kekuatan pengemulsinya.
Ini juga menciptakan lingkungan yang tidak bersahabat yang menghambat penggandaan sel yang berlebihan dan merangsang pertumbuhan hifa , juga mendukung produksi klamidospora; yang terakhir dianggap struktur perlawanan. Struktur ini membantu dalam identifikasi spesies Candida albicans .
Untuk bagiannya, glukosa dalam media ini meningkatkan kapasitas pembentukan pigmen beberapa jamur.
Perlu dicatat bahwa media tepung jagung dengan glukosa tidak berguna untuk demonstrasi klamidospora di kompleks Candida albicans .
Persiapan
Persiapan Agar Tepung Jagung Buatan Sendiri
Timbang 47 g tepung jagung kuning dan larutkan dalam 500 ml air suling . Panaskan hingga 60 C, sedangkan sediaan diaduk dalam waktu kurang lebih 1 jam. Kemudian saring melalui sepotong kain kasa dan kapas, opsional dapat disaring lagi dengan melewatkan preparat melalui kertas saring Whatman No. 2.
Dicukupkan volumenya hingga 1000 ml dengan air suling. Tambahkan 17 gr agar-agar, panaskan hingga larut. Autoklaf selama 15 menit pada 121ºC.
Sajikan dalam cawan Petri steril. Simpan di lemari es.
Warna media yang disiapkan adalah keputihan dengan penampakan yang menggumpal.
Jika Anda ingin menyiapkan tepung jagung dengan glukosa ke dalam persiapan yang dijelaskan di atas, tambahkan 10 g glukosa.
agar tepung jagung komersial
Timbang 17 g media dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air suling. Campuran dapat dipanaskan, dikocok perlahan agar larut sepenuhnya. Sterilkan dalam autoklaf pada 121 C, pada 15 lb, selama 15 menit.
Tuang ke dalam cawan petri steril. Biarkan memadat. Balikkan dan simpan di lemari es sampai digunakan. Tempelkan sebelum digunakan.
PH harus 6,0 ± 0,2 pada 25 C.
Agar tepung jagung dengan Tween 80
Untuk memenuhi ISO 18416, agar tepung jagung harus disiapkan sebagai berikut:
Timbang 65 gram per liter dan tambahkan 10 ml Tween 80. Panaskan dan didihkan selama beberapa menit sampai larut, berhati-hatilah agar tidak terlalu panas. Sterilkan pada 121 C selama 15 menit.
Agar tepung jagung dengan glukosa
Untuk meningkatkan daya kromogenik koloni Trichophyton rubrum dan membedakannya dari T. mentagrophytes , 0,2% glukosa dapat ditambahkan ke formula asli. Anda tidak perlu memiliki Tween 80, karena glukosa menghambat pembentukan klamidospora.
Menggunakan
Terutama, penggunaan agar tepung jagung ditujukan untuk studi strain Candida, membantu identifikasi mereka melalui pengamatan karakteristik klamidospora pada spesies albicans. Artinya, penggunaan agar-agar ini berfungsi sebagai metode tambahan untuk identifikasi ragi ini.
Spesies saprofit dan patogen dapat berkembang pada agar ini, tetapi masing-masing membentuk struktur miselium yang khas. Misalnya, spesies dari genus Torulopsis tidak menghasilkan miselium dan hanya berkembang biak dengan blastoconidia.
Demikian pula spesies Trichosporon dan Geotrichum menghasilkan arthroconidia pada agar tepung jagung dan terkadang sulit untuk membedakan antara yang satu dengan yang lainnya.
Arthroconidia dari genus Geotrichum menghasilkan perpanjangan hifa yang menyerupai tongkat hoki.
Juga produksi pigmen menggunakan agar tepung jagung yang dilengkapi dengan glukosa berguna dalam identifikasi Trichophytom rubrum.
Ditaburkan
Koloni Candida yang dicurigai diperoleh dalam media kultur primer – agar Sabouraud – dari sampel klinis, kosmetik, tanah, antara lain, disubkultur dalam agar tepung jagung . Media diunggulkan dan diinkubasi pada suhu 22ºC selama 24 hingga 48 jam. Waktu inkubasi dapat diperpanjang jika perlu.
Demonstrasi klamidospora
Untuk tujuan ini, agar tepung jagung dengan Tween 80 harus diinokulasi menggunakan teknik Dalmau. Metode ini terdiri dari mengambil sebagian koloni yang dicurigai dengan pegangan platina dan membuat tiga potongan paralel di tengah, menjaga pegangan pada 45º. Potongan harus dipisahkan dengan jarak 1 cm dari satu sama lain.
Selanjutnya, benda penutup yang telah dinyalakan sebelumnya diletakkan pada guratan-guratan yang telah disemai, sedemikian rupa sehingga sebagian tertutup dan sebagian lagi terbuka.
Inkubasikan plate seed pada suhu 30°C selama 48-72 jam kemudian amati di bawah mikroskop melalui kaca penutup.
Pemeliharaan strain jamur
Untuk pemeliharaan galur, pelat yang diunggulkan dan ditanam disimpan di lemari es (4 hingga 8 C). Dengan cara ini mereka dapat bertahan beberapa minggu dan digunakan untuk tujuan pengajaran atau penelitian.
QA
Untuk pengendalian sterilitas, plat yang tidak diinokulasi diinkubasi pada suhu kamar, diharapkan tidak terjadi pertumbuhan atau perubahan warna.
Untuk kontrol kualitas, galur yang diketahui dapat ditaburkan seperti: Staphylococcus aureus , ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.
Hasil yang diharapkan adalah penghambatan parsial untuk S. aureus dan E. coli. Sementara pertumbuhan yang memuaskan diharapkan pada galur-galur lainnya.
Aspergillus niger tumbuh dengan koloni hitam dan bersporulasi dalam perkiraan waktu inkubasi 5 hari.
Koloni ragi Candida albicans dengan produksi klamidospora.
Saccharomyces cerevisiae menghasilkan sel ragi yang besar.
Keterbatasan
Endapan kuning terbentuk di bagian bawah pelat yang tidak boleh disamakan dengan koloni.
Referensi
- Laboratorium Neogen. Agar tepung jagung. Tersedia di: foodsafety.neogen.com.
- Mikrokit Media Kultur. Agar tepung jagung. Tersedia di: Medioscultivo.com.
- Linares M, Solis F. Panduan Identifikasi Ragi. Tersedia di: http: //www.guia.revibero.
- Urcia F, Guevara M. Rev. Perú Med.Exp. Kesehatan Masyarakat, 2002; 19 (4): 206-208. Tersedia di: Scielo.com
- Casas-Rincón G. Mikologi Umum. 1994. Edisi ke-2 Universitas Pusat Venezuela, Edisi Perpustakaan. Venezuela Caracas.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Castillo E. Studi perbandingan beberapa metode makro dan mikroskopis untuk isolasi dan pengenalan genus Candida. Pendeta Kolombia Ilmu Kimia Farmasi. 1970; 3 (1): 33-57. Tersedia di: Ciencias.unal.edu.co
