nutrient agar adalah media nonselektif dan tidak ada budaya yang solid diferensial. Semua jenis bakteri yang tidak menuntut dari sudut pandang nutrisi tumbuh dalam media ini .
Ini adalah media yang sederhana dan, terlepas dari namanya, mengandung nilai gizi yang lebih rendah dibandingkan dengan media serupa lainnya, seperti Brain Heart Infusion Agar atau Trypticase Soy Agar.
Jumlah koloni pada agar nutrisi
Kegunaannya di laboratorium sangat bervariasi. Hal ini terutama digunakan untuk subkultur spesies, memelihara strain, menghitung koloni, sebagai dasar untuk menyiapkan agar darah, antara lain.
Demikian juga, karena warna krem mudanya, produksi pigmen yang dihasilkan oleh beberapa strain bakteri dapat sangat dibedakan, seperti pigmen kehijauan Pseudomonas aeruginosa , pigmen merah bata yang dihasilkan oleh Serratia marcescens pada suhu kamar, pigmen kuning keemasan dari Staphylococcus aureus, antara lain.
Selain itu, ini adalah salah satu media tanam termurah di pasaran.
Indeks artikel
Dasar
Seperti yang telah disebutkan di atas, ini adalah media yang sangat sederhana yang bergantung pada penyediaan nutrisi untuk pertumbuhan bakteri tanpa batasan dan tanpa reaksi kompleks untuk ditafsirkan.
Karena medianya tembus cahaya, sangat ideal untuk menghitung koloni dengan metode penyemaian mendalam.
Komposisi
Ini terutama terdiri dari ekstrak daging atau ekstrak ragi, pepton atau cerna pankreas gelatin, agar-agar, natrium klorida dan air suling.
Daging atau ekstrak ragi dan pepton merupakan sumber penting dari karbon dan mineral (nitrogen, fosfor dan belerang), yang akan digunakan oleh bakteri sebagai sumber energi dan faktor pertumbuhan.
Demikian pula, agar-agar adalah dasar dari semua media kultur padat, menggantikan gelatin, yang merupakan senyawa dasar pertama yang digunakan oleh Robert Koch untuk memberikan konsistensi padat pada medianya.
Agar merupakan polisakarida yang tersusun dari galaktosa, galaktomanan, agarosa, dan agaropektin. Itu set pada 40 ° C dan meleleh mendekati 100 ° C.
Untuk bagiannya, natrium klorida menyediakan media dengan osmolaritas yang diperlukan untuk perkembangan bakteri.
Akhirnya, air berfungsi untuk menghidrasi dan melarutkan senyawa terliofilisasi. Air suling yang disesuaikan dengan pH netral harus digunakan. Air keran tidak boleh digunakan karena mengandung kalsium dan magnesium yang dapat bereaksi dengan fosfat dalam medium dan membentuk garam yang tidak larut.
Persiapan
Untuk satu liter agar nutrisi, 31 g media dehidrasi harus ditimbang. Itu ditempatkan dalam labu dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 5 menit berdiri, panaskan di atas sumber panas dan aduk terus sampai mendidih selama 1 atau 2 menit.
Persiapan media biakan.
Labu tersebut kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121°C selama 20 menit.
Sterilisasi dalam autoklaf
Pada akhir waktu, dikeluarkan dari autoklaf dan disajikan dalam cawan Petri steril, menggunakan tudung aliran laminar atau pembakar Bunsen .
Jika cawan Petri sekali pakai (plastik), media harus didistribusikan ketika agar-agar memiliki suhu sekitar 50 ° C, untuk mencegahnya berubah bentuk oleh panas yang berlebihan.
Biarkan memadat dan simpan pada dudukan pelat terbalik dan dinginkan pada 2-8 ° C sampai digunakan.
Piring harus ditempa sebelum diunggulkan. Pelat agar nutrisi tidak boleh digunakan jika terkontaminasi atau dehidrasi.
PH media yang disiapkan harus disesuaikan dengan 7,3 ± 0,2.
Kegunaan
Ini adalah media kultur paling sederhana yang digunakan di laboratorium mikrobiologi. Formulasinya sangat baik untuk pertumbuhan bakteri yang tidak menuntut.
Penggunaan utamanya dijelaskan di bawah ini:
Sebagai dasar pembuatan agar darah
Media ini terkadang digunakan sebagai bahan dasar untuk membuat agar darah, namun ini bukan bahan dasar yang paling umum digunakan.
Merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora
Media kultur ini sangat berguna untuk merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora seperti Bacillus sp.
Untuk ini, galur genus Bacillus ditaburkan dan diinkubasi selama 24 jam pada 37 ° C dalam aerobiosis. Setelah koloni tumbuh, cawan diberi tekanan suhu, yaitu suhu oven dinaikkan menjadi 44 ° C dan dibiarkan selama 24 jam atau ditempatkan di lemari es selama 24 jam.
Pada akhir waktu, apusan kultur dibuat dan diwarnai dengan pewarnaan Gram atau dengan pewarnaan spora Shaeffer-Fulton. Di dalamnya, basil dengan endospora (spora di dalam basil) dan eksospora (spora di luar basil) akan diamati.
Pemeliharaan regangan
Beberapa laboratorium penelitian atau laboratorium pendukung pengajaran universitas memerlukan pemeliharaan bakteri hidup yang penting secara klinis selama mungkin, untuk menggunakan bank bakteri (bacterioteca) untuk pekerjaan penelitian atau untuk persiapan praktik pengajaran, di mana Siswa akan belajar memanipulasi dan mengidentifikasi mikroorganisme ini.
Agar nutrisi, serta agar infus jantung otak, dapat digunakan untuk tujuan ini. Agar-agar disiapkan, dituangkan ke dalam tabung dengan tutup bakelite dan dimiringkan di atas dasar, sedemikian rupa sehingga agar-agar mengeras, membentuk blok di bagian bawah dan bevel di permukaan (paruh seruling).
Setiap tabung diberi label dengan nama bakteri yang akan disemai dan tanggalnya. Masing-masing bakteri akan disemai pada bezel dan diinkubasi selama 24 jam.Setelah koloni tumbuh, tabung disimpan pada suhu kamar.
Bakterioteka harus diperbarui dari 1 hingga 3 bulan, untuk menghindari kontaminasi dan dehidrasi media dan juga kematian bakteri.
Hanya bakteri non-rewel yang dapat dipertahankan dengan cara ini.
jumlah koloni
Meskipun ada cara khusus untuk menghitung koloni, seperti agar hitung standar, agar nutrisi dapat digunakan untuk tujuan ini, baik dengan penyemaian permukaan dengan spatula drigalski atau dengan kedalaman. Untuk alasan ini sangat berguna dalam analisis mikrobiologi makanan dan air.
Menjalankan tes diagnostik
Karena merupakan media yang tidak mengandung darah, atau bahan tambahan lainnya, sangat ideal untuk mengambil koloni yang tumbuh pada media ini untuk melakukan uji katalase.
Demikian juga karena warnanya yang terang, diindikasikan untuk melakukan uji oksidase secara langsung pada area agar yang diunggulkan, tanpa gangguan.
Pemulihan aerob mesofilik dari perairan asin rekreasi (Pantai)
Agar nutrisi yang disiapkan dengan 10% air laut berguna untuk evaluasi aerob mesofilik di perairan pantai.
Dengan cara ini, tingkat kontaminasi sebenarnya yang dimiliki perairan dengan mikroorganisme ini dapat diketahui, karena pada sampel jenis ini hasilnya tumpang tindih jika menggunakan media kultur yang disiapkan dengan cara konvensional.
Hal ini ditunjukkan oleh Cortez et al. pada tahun 2013 dalam sebuah karya penelitian.
Hal ini dapat dijelaskan karena perubahan mendadak yang dialami bakteri ketika berpindah dari lingkungan hipersalt ke lingkungan rendah garam, oleh karena itu mikroorganisme memasuki keadaan lesu di mana mereka layak, tetapi tidak dapat dibudidayakan.
Referensi
- “Agar bergizi.” Wikipedia, Ensiklopedia Bebas . 13 Sep 2016, 20:33 UTC. 29 Des 2018, 21:04 en.wikipedia.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosa Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 edisi Argentina. Editorial Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosa Mikrobiologi. (edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
- Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media budaya disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa di Chichiriviche, negara bagian Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
- Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M dan Cardoso M. Kualitas mikrobiologis air untuk dosis inseminasi, untuk babi. Cient.Agro.Amaz . 2013; 1 (2): 42-49.
- García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinik praktis. Universitas Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.
